Антигрибковая грунтовка глубокого проникновения-особенности, использование

---

• ПОСЛЕДНИЕ ЗАПИСИ
Краски и эмали по металлу и ржавчине Пленка гидроизоляционная для крыши Как выбрать хорошую акриловую ванну Какие бывают розетки, их устройство, типы и классификация
• РУБРИКИ
• Автоматическое открывание, проветривание и полив теплиц
• Акриловые краски
• Балкон
• Блоки арболитовые
• Бурение скважин на воду
• Вода из скважины
• Водосток кровельный
• Воздух в квартире
• Выращивание дома
• Гидроизоляция
• Гидрофобизация материалов
• Дорожки садовые
• Камин своими руками
• Каркасный дом
• Кладка печи своими руками
• Крыша из металлочерепицы
• МДФ
• Монтаж кровли
• Монтаж ламината
• Монтаж линолеума
• Монтаж подложки под ламинат
• Натяжные потолки
• Опилкобетон
• ОСБ плита
• Отделка откосов
• Оштукатуривание
• Полипропиленовые трубы
• Расход материалов
• Тротуарная плитка
• Устройство отмостки
• Утепление
• Утепляем баню самостоятельно
• Фасад
• Фундамент из свай
• Шлакоблок
• Эмаль для ванны

Грунтовка глубокого проникновения

Споровые особи существуют на Земле чуть ли не со времен сотворения мира. Грибки различного рода и плесень настолько вездесущи и с такой скоростью размножаются, что если не принимать никаких мер, они способны достаточно быстро завоевать планету. И это не фантастика – такова суть природы грибков.

Грибок в вашем доме

Визуально сложно определить, пропитаны ли стены, полы вашего дома плесневым грибком – чаще всего его споры прячутся в структуре материала, постепенно его разрушая. Те же пятна серо, буро, черного цвета, которые проступают на поверхности, являются либо свидетельством начала заражения, либо следствием полного заполнения внутренних пор материала.

Проявиться плесень может в любом помещении, независимо от соблюдения там правил гигиены. Потому что причины ее образования достаточно тривиальны.

• Плохая гидроизоляция поверхностей способствует проникновению влаги в поры строительного материала. И эта постоянная сырость – благодатная среда для роста грибков. Чем старше здание, тем хуже у дома изоляция от влаги.
• Вечно холодные, промерзающие стены – еще один повод плесени поселиться здесь. Чаще всего это наблюдается в нежилых квартирах либо там, где нарушена теплоизоляция.
• Плохие стыки между панелями позволяют спорам плесени селиться в образовавшихся щелях и ждать своего часа, чтобы проявиться снаружи.
• Протекающие крыши и холодные чердаки – еще один момент, которым пользуются грибки плесени.
• Деревянные полы (особенно настеленные на грунтовое основание) даже при хорошей обработке обладают гигроскопичностью. И, пораженные грибком, разрушаются быстрее любого другого материала.
• Плохая вентиляция в помещениях повышенной влажности (кухнях, ванных комнатах, санузлах) – подходящее условие для плесневого грибка.

Проводя борьбу с плесенью, нельзя заниматься удалением только видимых ее проявлений. Пропитке следует подвергнуть все поверхности, и применять для этого средства глубокого проникновения.

Антигрибковые средства

Независимо от того, заметили вы намеки на плесень в своем доме, профилактику появления грибка следует проводить регулярно. И удачным моментом для этого будет подоспевший ремонт.

Перед тем, как заниматься свежей отделкой стен, потолков, полов, их обрабатывают антигрибковой грунтовкой глубокого проникновения. Препараты эти разрабатывают на основе акрила, алкида, латекса. Одни средства изготавливаются под определенную поверхность (камень, дерево, бетон, гипсокартон и т.п.), другие представляют собой антибактериальный препарат универсального действия.

Среди часто используемых можно выделить следующие препараты:

• «Milkill» разработан на основе латекса и по структуре своей представляет антигрибковую эмульсию, расфасованную в пластиковые ведерки. Грунтовка предназначена для обработки кирпичной и бетонной поверхности с мелкими порами. При использовании во влажных помещениях рекомендуется наносить 3 слоя.
• «Acryl Grundierung» OLYMPIC, исходя из названия, имеет акриловую основу. Обладает свойством достаточно глубокого проникновения в любую поверхность. Данное универсальное средство хорошо защищает обработанный материал и уменьшает его способность впитывать влагу.
• Хороший результат при обработке поверхностей, зараженных грибком, дают концентрированные препараты. «Ceresit СТ 99» борется не только с грибками и плесенью – средство рассчитано также на лишаи и мох, растущие на кирпичных, бетонных поверхностях и штукатурке. Поэтому можно применять не только для внутренней обработки, но и по фасаду.

На универсальных грунтовках можно сэкономить средства, купив одно средство сразу для всех покрытий. Но качественным обеззараживание будет, если использовать антисептик, разработанный для обработки конкретных материалов. И особенно это касается деревянных поверхностей.

Грунтовки противогрибковые по дереву

Древесину нужно изначально основательно обрабатывать инсектицидами, т.к. это самый восприимчивый на плесень материал. Дерево, зараженное грибком, разрушается довольно быстро. Поэтому обрабатывать деревянные поверхности желательно ежегодно.

С этой целью можно использовать ниже приведенные препараты:

• Грунтовка «Dufa — Holzlasur» выпускается немцами в виде глазури и служит для глубокой пропитки древесины. Препарат хорошо защищает от заражения плесенью и эффективно уничтожает появившиеся споры. 1-го литра глазури хватает на 10 кв. метров деревянной поверхности.
• Финны предлагают комплексный уход. Предварительно рекомендуется применять пропитку «Tikkurila — Valtti Color», которая является хорошим антисептиком. Далее наносится грунтовка глубокого проникновения «Sadolin — Pinotex Base», изготовленная на алкидной основе. На обработанной данными средствами поверхности появляется достаточная стойкая пленка, которая защищает от проникновения влаги вглубь древесины.
• Антигрибковое средство «Мaster- Antigrib» хоть и относится к универсальным, но отлично пропитывает древесину, не только уничтожая плесень, а также препятствуя новообразованиям мицелия. Радикальный уничтожитель грибков и гнили эффективен также для применения снаружи здания, создавая защитную пленку на фасаде.

Но мало купить препараты с антигрибковыми свойствами – необходимо еще и правильно их применить.

Как работать с грунтовкой

Перед тем, как наносить грунтовку на любую из поверхностей, последнюю необходимо подготовить. Так что до использования антисептика придется выполнить еще часть другой работы.

• Поверхность должна быть чистой. Если есть необходимость, ее вымывают теплой водой. Там, где имеется на поверхности плесень, промывку делают с добавлением в мыльную воду «Белизны». При хорошо въевшемся грибке желательно применить по кирпичной кладке и штукатурке паяльную лампу.
• Следующий шаг – просушка вымытых поверхностей. Чтобы ускорить процесс, можно воспользоваться феном строительным, вентилятором или теплоконвектором (особенно во влажных помещениях). Параллельно следует проветривать комнаты, поэтому подобные работы рекомендательно проводить в теплый период года.
• Когда поверхности полностью высохнут, приступают к нанесению антигрибковой грунтовки. Можно делать это методом напыления либо использовать валик. Но лучшим способом будет нанесение препарата с помощью малярной кисточки (щетина должна быть натуральной) – так легче «доставить» средство в труднодоступные места.

Данная технология была описана для всех поверхностей, кроме деревянных, т.к. данный материал требует несколько иного подхода.

• Сначала очищают зараженные места – их соскабливают металлической щеткой либо ножом. Каждый раз при переходе на следующий участок используемые инструменты обрабатываются антисептиком. Соскобы собирают в металлическую емкость и сжигают, чтобы не дать грибку возможность «зацепиться» в другом месте.
• Очищенные места древесины тщательно вымывают. В моющие средства следует добавить перекись водорода, а также медный купорос (соду пищевую или уксус).
• После того, как эти участки просохнут, вымывают всю площадь поверхности, подлежащей обработке грунтовкой.
• Просушку можно осуществлять способом, описанным выше.
• Древесину предварительно пропитывают антибактериальным препаратом и через небольшой промежуток времени покрывают грунтовкой по дереву.

Занимаясь борьбой с плесенью, следует учитывать, что антигрибковые препараты и пары «Белизны» вредны для человека и могут вызвать отравление. Поэтому при работе с ними необходимо соблюдать элементарные правила безопасности: надевать защитные перчатки и очки, а также глухую закрытую одежду, дышать через респиратор. Это также защитит самого работника от заражения грибковыми спорами.

Профилактика грибка

Чтобы меньше сил пришлось тратить на борьбу с грибком, следует соблюдать правила, позволяющие не допускать распространения плесени. Помимо использования антигрибковой грунтовки нужно предпринять еще ряд мер.

• Следите за чистотой и работоспособностью вентиляционной системы.
• Водопроводные и канализационные коммуникации не должны стать источником лишней влаги. Поэтому все протечки необходимо устранять вовремя.
• Для жителей последних этажей и частников немаловажна целостность кровли.  Поэтому крыша требует особого внимания.
• Жильцам первых этажей следует позаботиться о дополнительной гидроизоляции полов. Если настил деревянный, под ним желательно освежить стяжку.
• В старых домах не помешает дополнительная гидро- и теплоизоляция.
• Даже временно нежилые помещения нельзя «бросать на произвол» – их следует время от времени проветривать и прогревать.

Проявив должное внимание к своему жилью, вы можете быть уверены, что избежали большинства проблем.

В заключение

Если на стенах и других поверхностях в вашей квартире нет признаков плесени, это не значит, что ее нет вообще. Лучше лишний раз перестраховаться и периодически проводить профилактические мероприятия. Даже невидимая глазу плесень, затаившаяся внутри панелей, может стать причиной многих болезней. Всевозможные аллергии, бронхиальные астмы и инфекции дыхательных путей могут быть спровоцированы парами, выделяемыми спорами грибка. Обычный насморк, приступы мигрени, вегетососудистая дистания – за это также в ответе плесень. Грибок способен влиять на настроение, вводя человека в депрессию, на его работоспособность и снижение иммунитета. Но страшнее всего то, что грибки приводят к онкологическим заболеваниям.

Грунтовка антигрибковая в категории “Строительство”

Kolorit Start Biostop антигрибковая грунтовка 5л

Доставка по Украине

309.43 грн

319 грн

Купить

Грунтовка антигрибковая глубокопроникающая AURA Unigrund Bioblock 1 л

Доставка из г. Калуш

92 грн

97 грн

Купить

Грунтовка антигрибковая глубокопроникающая AURA Unigrund Bioblock 5 л

Доставка из г. Калуш

291 грн

306 грн

Купить

Грунтовка Антигрибковая «Классик C4» Глубокопроникающая 0.9л

Доставка по Украине

по 47 грн

от 2 продавцов

47 грн

Купить

Грунтовка Антигрибковая глубокопроникающая Elite «Класик С4» 5л (458107)

На складе в г. Житомир

Доставка по Украине

178 грн

213 грн

Купить

Житомир

Грунтовка антигрибковая глубокопроникающая Elite «Класик С4» 10л (458106)

На складе в г. Киев

Доставка по Украине

334 грн

401 грн

Купить

Грунтовка антигрибковая глубокопроникающая Elite «Класик С4» 0,9л (458105)

На складе в г. Киев

Доставка по Украине

47 грн

55.80 грн

Купить

Грунтовка антигрибковая “Биозащита для дерева” 1л

Доставка по Украине

28 грн

Купить

Грунтовка антигрибковая “Биозащита для дерева” 2л

Доставка по Украине

50 грн

Купить

Грунтовка антигрибковая “Биозащита для дерева” 5л

Доставка по Украине

120 грн

Купить

Грунтовка Антигрибковая глубокопроникающая «Класик С4» 5 л

На складе

Доставка по Украине

179 грн

214 грн

Купить

Грунтовка Антигрибковая глубокопроникающая «Класик С4» 10 л

На складе

Доставка по Украине

336 грн

403 грн

Купить

Грунтовка Антигрибковая глубокопроникающая «Класик С4» 0,9 л

На складе

Доставка по Украине

47 грн

55.80 грн

Купить

Грунтовка антигрибковая глубокопроникающая «Класик С4» 0,9л (458105)

На складе

Доставка по Украине

47 грн

55. 80 грн

Купить

Грунтовка антигрибковая глубокопроникающая Elite Construction Классик C4 0.9 л

Доставка по Украине

по 47 грн

от 3 продавцов

47 грн

Купить

Смотрите также

Грунтовка Антигрибковая Классик C4 Глубокопроникающая Elite Construction 0,9 л

На складе в г. Днепр

Доставка по Украине

53 грн

Купить

Грунтовка Антигрибковая Классик C4 Глубокопроникающая Elite Construction 10 л

На складе в г. Днепр

Доставка по Украине

376 грн

Купить

Грунтовка антигрибковая “Классик – 4” глубоко-проникающая 5 л

Доставка по Украине

182 грн

Купить

Грунтовка Антигрибковая «Классик – 4» Глубокого проникновения, 0,9л

Доставка по Украине

48 грн

Купить

Грунтовка Антигрибковая 0,9л «Классик C4» Глубокопроникающая |Грунтовка Антигрибкова 0,9л «Класік C4»

Доставка из г. Сумы

37 грн

Купить

Грунтовка адгезионная PREPARA FONDO EVO для гладких и невпитывающих оснований 10 кг

На складе

Доставка по Украине

по 4 854 грн

от 3 продавцов

4 854 грн

Купить

Грунтовка адгезионная PREPARA FONDO EVO для гладких и невпитывающих оснований 5 кг

На складе

Доставка по Украине

по 2 742 грн

от 3 продавцов

2 742 грн

Купить

Грунтовка глубокого проникновения Litokol PRIMER C 5 л

Доставка по Украине

по 1 428 грн

от 3 продавцов

1 428 грн

Купить

Грунтовка для штукатурных и гипсовых поверхностей Litokol PRIMER X94 10 л

Доставка по Украине

по 2 322 грн

от 2 продавцов

2 322 грн

Купить

Грунтовка для штукатурных и гипсовых поверхностей Litokol PRIMER X94 5 л

Доставка по Украине

по 1 386 грн

от 2 продавцов

1 386 грн

Купить

Грунтовка антимикробная Ceresit CT 99 1л

На складе в г. Одесса

Доставка по Украине

251 грн

Купить

Одесса

Грунтовка акриловая глубокого проникновения MOZAICA 5л ПЭТ

Под заказ

Доставка по Украине

51 грн

Купить

Грунтовка акриловая глубокого проникновения MOZAICA 10л

Доставка по Украине

175 грн

Купить

Грунтовка акриловая концентрат 1:4 глубокого проникновения 10кг (с индикатором) UNIFIX

Доставка из г. Харьков

290.52 — 413 грн

от 13 продавцов

292.80 грн

Купить

Харьков

Национальная противогрибковая эмульсия яичной скорлупы

О продукте

Национальная противогрибковая эмульсия яичной скорлупы

Краска National Eggshell Antifungal Emulsion создана на основе специально модифицированного акрилового сополимера для защиты внутренних и наружных поверхностей с покрытием от роста грибков, водорослей, плесени, дрожжей и т. д., которые могут вызвать инфицирование и повреждение окрашенных поверхностей. Обладает широким спектром действия против грибков, бактерий, плесени и т.д. Обладает очень хорошей адгезией и отличной устойчивостью к щелочам. Его легко стирать, а сухая пленка нетоксична для контакта с человеком.

National Eggshell Anti Fungal Emulsion

Калькулятор краски

Длина (м)

ширина (м)

высота (м)

Двери

Окна

Название и код краски Национальная противогрибковая эмульсия из яичной скорлупы Приблизительная площадь этой комнаты: Рекомендуемое количество краски для этой комнаты:

Аналогичные продукты

Базовое покрытие Expressions

Узнать больше

Выражения Диаманти

Узнать больше

Выражения Блеск

Узнать больше

Выражения Bellissi Perla

Узнать больше

Выражения Эссенца

Узнать больше

Выражения Металлик

Узнать больше

Акриловая грунтовка Expressions

Узнать больше

Эмульсия национальной ценности

Узнать больше

НЕОБХОДИМЫЕ ИНСТРУМЕНТЫ

КАТАЛОГИ

Исследуйте мир красок, текстур и оттенков для вашего следующего личного или профессионального продукта.

ВЫБОР

Цвет

палитра

Найдите точный цвет, оттенок и оттенок, который вы хотите, из наших самых популярных цветовых схем.

ВЫБОР

Краска

Калькулятор

Подсчитайте, сколько краски вам
понадобится для вашего проекта.

SELECT

Найти магазин

Найдите официального дистрибьютора продукции National
Paints.

ВЫБЕРИТЕ

Тестирование дрожжей на чувствительность к противогрибковым препаратам: учебник для начинающих

Срок действия: 25 апреля 2025 г.

Презентация

Докладчик

Нэнси Венгенак, доктор философии.

Профессор лабораторной медицины и патологии
Профессор микробиологии
Отделение микробиологии
Клиника Мэйо, Рочестер, Миннесота

Стенограмма

Введение , Ижени Нэнси, директор

, 9005, 900 лаборатории микологии и микобактериологии отделения клинической микробиологии клиники Майо в Рочестере, штат Миннесота.

Сегодняшняя презентация «Горячая тема» предназначена для тех, кто рассматривает возможность проведения тестирования дрожжей на чувствительность в своей лаборатории, возможно, впервые, или для тех, кто решил отправить свои изоляты дрожжей в референс-лабораторию для тестирования чувствительности, но хочет чтобы понять, как референс-лаборатория генерирует данные, которые возвращаются к ним в отчетах о чувствительности.

Раскрытие информации

У меня нет информации, относящейся к этой «горячей теме».

Обзор

В сегодняшней «Горячей теме» я рассмотрю наиболее распространенные методы, используемые клиническими лабораториями для тестирования чувствительности к противогрибковым препаратам изолятов дрожжей, выращенных из микробиологических культур. Кроме того, я расскажу, как устанавливаются пограничные значения, и выделю противогрибковые препараты, для которых в настоящее время доступны стандартизированные критерии интерпретации и пограничные значения. Наконец, мы рассмотрим значение, известное как эпидемиологическое пороговое значение, или ECV, и я расскажу, как устанавливаются значения ECV, для каких дрожжей они доступны в настоящее время, и я расскажу, как следует использовать ECV.

Когда следует заказать тест на чувствительность дрожжей, выделенных в культуре?

Итак, когда я должен заказать тест на чувствительность дрожжей, выделенных в культуре? Тестирование чувствительности изолятов дрожжей к противогрибковым препаратам важно, чтобы помочь клиницистам в выборе противогрибковых препаратов, которые могут быть полезны при лечении клинически значимого заболевания. Однако это не означает, что тестирование на чувствительность следует проводить для каждого изолята дрожжей, выделенного из культуры в лаборатории клинической микробиологии. Тестирование на чувствительность следует проводить, если изолят считается клинически значимым для врачей, ухаживающих за пациентом. Изоляты культур дрожжей из обычно стерильных источников, таких как кровь или спинномозговая жидкость, почти всегда считаются значимыми, и следует проводить тестирование на чувствительность. Однако не все дрожжевые грибки, извлеченные из нестерильного источника, такого как мокрота, мазок изо рта или с кожи, являются клинически значимыми, и проведение тестирования на чувствительность этих изолятов может быть пустой тратой ограниченных ресурсов.

Кроме того, следует подумать о том, будет ли результат теста на восприимчивость действенным. Как мы обсудим в этой «Актуальной теме», эталонный метод и критерии интерпретации предназначены для наиболее часто встречающихся дрожжей, а именно для определенных видов Candida и видов Cryptococcus . Тестирование чувствительности других родов или других видов приведет к сообщению о минимальных ингибирующих концентрациях или MIC без сопутствующих интерпретирующих критериев, таких как «чувствительный» или «устойчивый». Отсутствие четких интерпретационных критериев затрудняет использование результатов определения чувствительности к противогрибковым препаратам для врачей. Ваша группа по инфекционным заболеваниям или группа по управлению противомикробными препаратами могут помочь разработать рекомендации для вашей лаборатории о том, когда проводить тестирование чувствительности дрожжей.

Как следует проводить тест на чувствительность дрожжей?

После принятия решения о проведении теста на чувствительность к противогрибковым препаратам существуют как минимум две крупные международные организации, которые предоставляют клиническим лабораториям рекомендации по проведению стандартизированного тестирования чувствительности дрожжей к противогрибковым препаратам. Этими двумя организациями являются Европейский комитет по тестированию на чувствительность к противомикробным препаратам (или EUCAST) и Институт клинических и лабораторных стандартов (также известный как CLSI). Многие рекомендации двух групп согласованы, но существуют некоторые различия. В этой «актуальной теме» я сосредоточусь на методе CLSI и критериях интерпретации, но я рекомендую вам также посетить веб-сайт EUCAST по адресу www.eucast.org для получения дополнительной информации об их стандартах.

Методы определения чувствительности к противогрибковым препаратам

Хорошо. Итак, давайте немного поговорим о различных методах, которые можно использовать для тестирования чувствительности дрожжей к противогрибковым препаратам. Тестирование чувствительности к противогрибковым препаратам можно проводить с использованием фенотипических или генотипических методов. Генотипические методы, такие как таргетная ПЦР или секвенирование ДНК, используются для некоторых комбинаций грибов и противогрибковых препаратов, таких как исследование fks, гена глюкансинтазы, мутаций очага, которые вызывают резистентность к эхинокандину у Candida видов. Тем не менее, генотипические методы прогнозирования восприимчивости дрожжей не стандартизированы и по-прежнему в значительной степени используются в исследовательских лабораториях или лабораториях общественного здравоохранения.

Большинство клинических лабораторий в настоящее время используют фенотипические методы для тестирования противогрибковой чувствительности, и существует ряд различных фенотипических методов, которые можно использовать. Принятым эталонным методом является тестирование разбавления бульона, и этот метод признан эталонным как EUCAST, так и CLSI. Вместо эталонного метода многие больничные лаборатории могут выбрать метод микробульонного разведения с колориметрической конечной точкой, такой как обеспечиваемый планшетами YeastOne Sensititre от ThermoFisher, или они могут выбрать использование автоматического прибора для микробульонного разведения, такого как Vitek от bioMérieux. Часто выбирают эти альтернативные методы, потому что панели чувствительности имеются в продаже, что делает их удобными для занятых лабораторий, которые предпочитают покупать, а не изготавливать панели для разбавления бульона самостоятельно. Наконец, метод дисковой диффузии или градиентные полоски МИК, такие как Е-тестовые полоски или градиентные полоски от Lilofilchem, также коммерчески доступны и используются в некоторых лабораториях.

Эталонный метод CLSI для определения чувствительности дрожжей к противогрибковым препаратам (http://clsi.org) 

Если вы намереваетесь провести тестирование чувствительности дрожжей в своей лаборатории с использованием метода разбавления в бульоне, есть два документа CLSI, в которых содержится очень полезная информация. . Документ CLSI M27 обеспечивает методологическую основу для выполнения метода разбавления эталонного бульона. M27 охватывает выбор и приготовление противогрибковых средств, необходимые процедуры контроля качества, а также подробно описывает, как выполнять саму процедуру тестирования. Сопутствующий документ M60 содержит таблицы со стандартными контрольными точками и критериями интерпретации, доступными для дрожжей. Я полагаю, что документ M60 будет перенумерован в ближайшем будущем и опубликован в качестве дополнения к документу M27, поэтому, пожалуйста, следите за изменением нумерации этого документа, когда это произойдет. Документ о контрольных точках и критериях интерпретации ежегодно обновляется CLSI по мере поступления новых данных. Документ по эталонному методу требует менее частых пересмотров и поэтому обновляется каждые три года или около того, в зависимости от развития событий в данной области.

Документ M27 предназначен для предоставления методологии тестирования чувствительности видов Candida и видов Cryptococcus , но он еще не прошел проверку для использования с другими родами дрожжей или с дрожжевыми формами эндемичных диморфных патогенов, таких как Histoplasma capsulatum или Blastomyces dermatitidis . Этот метод также не предназначен для использования с нитчатыми плесневыми грибами, такими как виды Aspergillus , и существует отдельный стандарт CLSI для тестирования восприимчивости к плесени, документ CLSI M38.

Эталонный метод CLSI

Как я уже упоминал, признанным эталонным методом тестирования дрожжей на чувствительность к противогрибковым препаратам является разведение в бульоне. Этот метод был разработан и согласован в рамках международного процесса консенсуса, в котором использовались знания и опыт экспертов по микологии в больничных лабораториях клинической микробиологии и государственных учреждений, таких как CDC, FDA и Служба общественного здравоохранения Канады, а также экспертов из фармацевтическая промышленность и производители устройств. Использование эталонного метода значительно облегчает межлабораторное согласование при тестировании дрожжей на устойчивость к противогрибковым препаратам и улучшает уход за пациентами, обеспечивая надежные результаты определения чувствительности независимо от географического положения пациента. Как уже упоминалось, эталонным методом является разбавление в бульоне, но может быть выполнено либо макробульон, либо микробульон, и могут быть получены эквивалентные результаты независимо от того, какой формат выбран.

Обзор метода разбавления в микробульоне

Многие лаборатории предпочитают проводить тестирование дрожжей в разведении в микробульоне, а не в разведении в макробульоне, потому что метод разведения в микробульоне можно проводить в титрационных микропланшетах, что экономит затраты на реагенты и пространство в инкубаторе. Кроме того, как уже упоминалось, планшеты для разбавления микробульона коммерчески доступны. Для выполнения метода микробульонных разведений изолят тестируемых дрожжей должен быть выбран из чашки с агаром, содержащей чистую культуру микроорганизма. Необходимо следить за тем, чтобы смеси дрожжей или дрожжей, смешанных с бактериями, не тестировались, так как результат МПК, полученный для смеси, может быть неточным. Готовят стандартизированную суспензию дрожжей в стерильном физиологическом растворе или стерильной воде до концентрации, эквивалентной 0,5 стандарта МакФарланда. Из него готовят рабочий инокулят путем разбавления суспензии дрожжей бульоном RPMI до конечной стандартизированной концентрации. Затем инокулят добавляют в каждую лунку титрационного микропланшета, чаще всего с использованием повторяющегося или многоканального пипеточного дозатора. Планшет для микротитрования уже содержит тестируемые противогрибковые препараты, часто поставляемые в лиофилизированном или замороженном виде, и противогрибковые препараты распределяются на планшете рядами, при этом концентрация противогрибкового препарата увеличивается за счет удвоения разведения в градиенте поперек планшета или иногда вниз по поверхности планшета. колонка в зависимости от компоновки плиты. После инокуляции тестируемым изолятом дрожжей планшет закрывают и инкубируют при 35°C в течение от 24 до 48 часов при тестировании Candida видов. Cryptococcus neoformans и Cryptococcus gattii обычно растут медленнее, поэтому для Cryptococcus видов может потребоваться инкубация до 72 часов.

Определение MIC

После инкубации в течение необходимого периода панель можно считать либо вручную с помощью световой камеры, либо с помощью полуавтоматического планшетного ридера. Конечную точку определяют путем сравнения роста в каждой лунке по сравнению с контрольной лункой. Для эталонного метода разбавления бульона минимальная ингибирующая концентрация, или МИК, представляет собой наименьшую концентрацию противогрибкового амфотерицина В, предотвращающую рост дрожжей, или наименьшую концентрацию лекарственного средства, вызывающую 50-процентное снижение роста, что визуализируется заметным снижение мутности азолов, эхинокандинов и флуцитозина.

Коммерческие панели для разведения микробульона, такие как показанный на этом слайде, имеют колориметрический индикатор, который помогает определить конечную точку, и некоторые люди считают, что эти конечные точки легче читать, поскольку изменение цвета соответствует требуемому снижению роста. для каждого класса наркотиков с использованием эталонного метода. Это устраняет необходимость в том, чтобы персонал лаборатории определял уровень снижения роста на 50%, что может быть сложно для неопытного читателя. Синий цвет указывает на отсутствие роста, а розовый или фиолетовый цвет указывает на рост изолята дрожжей в этой лунке микротитровального устройства. Лунка в положении A1 в верхнем левом углу представляет собой лунку с положительным контролем роста, и эта лунка имеет розовато-фиолетовый цвет, что указывает на достаточный рост контрольного организма, поэтому планшет готов к считыванию. Эхинокандиновые препараты (анидулафунгин, микафунгин и каспофунгин) показаны в трех верхних рядах, конечная точка для каждого препарата обведена кружком. Для анидулафунгина конечная точка составляет 0,03 мкг/мл; для микафунгина конечная точка составляет 0,008 мкг/мл; а для каспофунгина конечная точка читается как 0,12 мкг/мл. Что касается эхинокандинов, то в некоторых источниках предполагается, что тестирование чувствительности к каспофунгину in vitro может быть технически сложным и что результаты не всегда коррелируют с активностью препарата in vivo. Поэтому некоторые эксперты рекомендуют использовать результаты тестирования на чувствительность к анидулафунгину или микафунгину в качестве заменителей эхинокандинов. Это все еще находится в стадии изучения, и это не означает, что каспофунгин не следует применять в клинике по показаниям; это просто означает, что лабораторные испытания каспофунгина in vitro могут не отражать его применимость in vivo.

Глядя на другие препараты на планшете, конечная точка для 5-флуцитозина в ряду D составляет 0,06 мкг/мл; позаконазол в ряду E имеет конечную точку 0,5 мкг/мл; вориконазол в строке F имеет МИК 0,12 мкг/мл; итраконазол в ряду G имеет МИК 0,25 мкг/мл; а флуконазол в строке H имеет МИК 8 мкг/мл. Амфотерицин В ориентирован сверху вниз на планшете в колонке 12, и его конечная точка составляет 0,5 мкг/мл. Принятая воспроизводимость метода разбавления бульона составляет плюс-минус одно 2-кратное или двукратное разведение. Итак, что это означает в практическом плане? Если мы используем вориконазол и итраконазол в качестве примера, МПК вориконазола читается как 0,12 мкг/мл. Если бы мы провели повторное тестирование во второй раз, результат МИК для второго теста мог бы составить 0,06, 0,12 или 0,25 мкг/мл, и они были бы практически такими же, как мы получили для первого теста, поскольку присущая тесту вариабельность положительная. или минус 1 двукратное разведение. Кроме того, если мы сравним МИК вориконазола и МИК итраконазола, то увидим, что они находятся в пределах плюс-минус 1 двойного разведения друг от друга при 0,12 мкг/мл и 0,25 мкг/мл, поэтому оба препарата можно рассматривать как имеющие практически эквивалентную конечную точку. Наличие более низкой МПК при 1-кратном разведении не означает, что в этом примере вориконазол будет лучшим выбором, чем итраконазол. Другие факторы, которые мы обсудим в дополнение к MIC, играют важную роль в выборе противогрибкового препарата для клинического применения. Наконец, важно помнить, что дрожжи должны быть полностью идентифицированы до видового уровня, чтобы выбрать правильные пограничные значения и критерии интерпретации. Мы также рассмотрим это более подробно на следующих слайдах.

Пограничные значения и критерии интерпретации из CLSI

В настоящее время для всех противогрибковых препаратов или для всех видов Candida , зависящих от видов, пограничных значений и критериев интерпретации нет. На момент написания этой записи контрольные точки доступны для эхинокандинов (а именно, каспофунгина, микафунгина и анидулафунгина) и двух азолов (флуконазола и вориконазола). Для этих пяти препаратов доступны видовые пограничные значения для шести различных Candida видов, которые представляют собой Candida Albicans , Candida Glabrata (также известный под новым названием Nakaseomyces glabrata ), Candida Tropicalis , Candida Krusei (который также является Antiad Lopicalis , Candida Krusei (как также называется Antaida , Candida Krusei . видов), Candida parapsilosis и Candida guilliermondii . Контрольные точки для конкретных видов недоступны для других видов Candida или других дрожжей, включая Cryptococcus 9.0098  виды. Для видов Candida без установленных пограничных значений и для Cryptococcus видов лаборатории должны сообщать значение МИК только без интерпретации и могут рассмотреть возможность добавления комментария к отчету, который указывает что-то вроде «для этого препарата нет стандартных интерпретационных критериев». ». Критерии интерпретации для дополнительных родов и видов дрожжей и для дополнительных противогрибковых препаратов будут добавлены в документ M60 по мере их поступления от Подкомитета по тестированию чувствительности к противогрибковым препаратам CLSI. Эта группа регулярно собирается для рассмотрения новых данных по мере их поступления и для установления дополнительных контрольных точек для документа M60 по конкретным видам.

Пример контрольных точек из M60

На этом слайде представлена ​​часть критериев интерпретации, которые доступны из документа M60. В этом примере мы рассматриваем пограничные значения МПК и критерии интерпретации для эхинокандинов анидулафунгина и каспофунгина. Как видно из этой таблицы, контрольные точки MIC различаются в зависимости от того, какой вид Candida тестируется. Например, Candida albicans с МПК менее или равным 0,25 мкг/мл будет считаться чувствительным к анидулафунгину, в то время как Candida glabrata с МИК 0,25 мкг/мл будет рассматриваться как имеющий промежуточную чувствительность к анидулафунгину. Пограничные значения МИК для устойчивости также отличаются для Candida albicans , устойчивого к анидулафунгину, при МИК больше или равном 1 мкг/мл, в то время как Candida glabrata считается устойчивым, если МИК больше или равен 0,5 мкг/мл. Я также должен упомянуть, что название Candida glabrata было недавно изменено на 9009. 7 Nakaseomyces glabrata  , но документы CLSI еще не были обновлены с учетом этого изменения названия. Главный вывод, который следует запомнить из этого слайда, заключается в том, что каждый вид Candida имеет свои собственные пограничные значения МПК и критерии интерпретации для каждого тестируемого препарата.

CLSI и EUCAST работают над установлением дополнительных контрольных точек  , где   возможно

Можно спросить, есть ли какая-либо другая доступная информация, которая поможет мне выбрать противогрибковые препараты, если у моего пациента инфекция, вызванная Candida  виды, отличные от перечисленных в M60, или если изолят Cryptococcus neoformans или  Cryptococcus gattii , потому что для этих дрожжей не установлены пограничные значения или критерии интерпретации? Чтобы ответить на этот вопрос, полезно подумать о том, как устанавливаются точки останова. Стандартизированные пограничные значения устанавливаются с использованием набора данных, включая распределение значений МИК для представляющих интерес видов по отношению к противогрибковому агенту, как определено эталонным методом, путем оценки фармакокинетических (ФК) и фармакодинамических (ФД) данных с помощью клинических испытаний. данные о результатах, а также с помощью постмаркетингового наблюдения за чувствительностью к противогрибковым препаратам. Для многих видов грибов и комбинаций противогрибковых препаратов получение каждого из этих фрагментов данных нецелесообразно. Например, могут потребоваться годы или даже десятилетия для завершения клинических испытаний, включающих достаточное количество пациентов с определенной грибковой инфекцией. Таким образом, данные о клинических исходах, полученные в ходе хорошо контролируемых клинических испытаний, редко доступны для многих типов грибковых инфекций. Поэтому, к сожалению, для многих видов грибов и комбинаций противогрибковых средств никогда не удастся установить пограничные значения.

Эпидемиологические пороговые значения 

Но есть еще одна часть данных, которая начинает становиться доступной для определенных бактерий и грибков, которые могут помочь понять, имеет ли конкретный изолят МИК, который обычно связан с изолятами дикого типа. этого вида, или может ли изолят иметь приобретенную или внутреннюю устойчивость к конкретному противогрибковому агенту, что может снизить вероятность благоприятного ответа. Этот фрагмент данных известен как эпидемиологическое пороговое значение или ECV. Иногда его также можно назвать значением ECOFF.

Эпидемиологические пороговые значения представляют собой значение МИК, которое разделяет микробные популяции на популяции с приобретенной или мутационной резистентностью и без нее на основе их фенотипов. ECV определяет верхний предел диапазона MIC для популяции микроба дикого типа. ECV указываются в мкг/мл, а их интерпретация указывается либо как «дикий тип», либо как «недикий тип». ECV дикого типа определяет изоляты без механизмов приобретенной устойчивости или мутационной устойчивости к тестируемому противогрибковому агенту. ECV недикого типа определяет изоляты, которые имеют предполагаемый или известный механизм устойчивости к противогрибковому агенту.

Документы CLSI с методом определения ECV (M57) и текущими значениями ECV для противогрибковых препаратов (M59)

Есть два дополнительных документа CLSI, которые предоставляют очень полезную информацию об эпидемиологических пороговых значениях для тестирования чувствительности к противогрибковым препаратам. Документ CLSI M57 содержит обоснование и метод установления ECV. Сопутствующий документ M59 содержит таблицы с EVC, которые были установлены как для дрожжей, так и для плесени. Документ M59 может быть перенумерован в будущем и опубликован в качестве дополнения к документу M57, поэтому следите за изменением нумерации этого документа, если оно произойдет. М59документ, содержащий ECV, может ежегодно обновляться CLSI по мере поступления новых данных. Документ по методу M57 реже нуждается в пересмотре и обновляется каждые три года или около того, в зависимости от развития событий в этой области.

Определение ECV

Так как же устанавливаются эпидемиологические пороговые значения? ECV устанавливаются эталонными организациями, устанавливающими стандарты, такими как EUCAST и CLSI, и они основаны исключительно на лабораторных данных MIC in vitro, собранных с использованием метода разбавления эталонного бульона. ECV устанавливаются путем объединения данных о МИК как минимум из трех независимых лабораторий, и эти данные о МИК получают путем тестирования не менее 100 различных изолятов интересующих видов дрожжей. Ни одна лаборатория не должна вносить более 50% данных МПК, чтобы избежать какой-либо погрешности, связанной с лабораторией, в ECV. Наличие более чем трех лабораторий, предоставляющих данные о МИК для большего числа изолятов, повышает надежность и надежность определения значения ECV. Тестируемые изоляты должны быть однозначно идентифицированы на уровне вида, и это чаще всего делается с использованием методов молекулярной идентификации, таких как секвенирование ДНК, а не с использованием фенотипических идентификаций, таких как микроскопическая морфология, поскольку морфология может вводить в заблуждение. Получить необходимые данные о МИК как минимум для 100 изолятов наиболее распространенных видов дрожжей достаточно легко, но получить 100 хорошо охарактеризованных изолятов некоторых менее распространенных видов может быть довольно сложно, и это одна из причин, почему В настоящее время ECV доступны только для определенных родов и видов дрожжей.

Как устанавливаются ECV?

Так как же устанавливаются эпидемиологические пороговые значения? Данные МИК для более чем 100 хорошо охарактеризованных изолятов интересующих видов нанесены на гистограмму в логарифмическом масштабе, подобную той, что показана в правой части этого слайда. Как правило, данные MIC распределяются по нормальному распределению, как показано голубыми полосами в левой части графика. Затем используется итеративный статистический метод для подгонки линии нормального распределения к данным МИК, как показано на слайде, и определяется мода для нормального распределения или распределения изолятов дикого типа. В примере на этом слайде нормальное распределение колеблется примерно от 0,5 мкг/мл до 8 мкг/мл с модой 2 мкг/мл. Обычно ECV устанавливается как MIC, который охватывает 97,5% нормального или дикого типа распределения изолятов. В примере на этом слайде статистически установлено, что ECV составляет 8 мкг/мл. Любые изоляты с МИК ниже установленного ECV 8 мкг/мл будут считаться изолятами дикого типа, а любые изоляты с MIC выше ECV 8 мкг/мл, например, с MIC 32 мкг/мл в коричневая полоса в этом примере будет считаться изолятом не дикого типа. Там, где это возможно, молекулярные исследования показали, что изоляты с MIC выше ECV часто содержат генетические мутации, которые могут сделать их устойчивыми к тестируемому лекарству.

ECV

Эпидемиологические пороговые значения основаны только на лабораторных данных in vitro . Сами по себе ECV не могут использоваться для прогнозирования клинического исхода или предположения о том, следует ли использовать конкретный противогрибковый агент. ECV не следует рассматривать как эквивалент точки останова. Например, изолят Candida krusei с МПК флуконазола, равной 16 мкг/мл, считается изолятом «дикого типа» с использованием ECV, но мы знаем, что изоляты дикого типа Candida krusei  устойчивы к флуконазолу, поэтому этот препарат не следует использовать для лечения инфекций, вызванных Candida krusei  , даже если он содержит ECV дикого типа.

Итак, зачем нужны ECV, если их нельзя использовать в качестве точек останова? ECV могут быть полезны, чтобы помочь клиницисту узнать, имеет ли изолят пациента предполагаемые или приобретенные мутации, которые могут снизить вероятность ответа на противогрибковый агент. ECV дикого типа не означает, что препарат будет или не будет работать против дрожжей. Это просто означает, что изолят не имеет известных предполагаемых или приобретенных механизмов устойчивости. Другой способ думать о ECV дикого типа состоит в том, что он не дает никакой информации о дополнительных факторах, которые необходимы для прогнозирования полезности противогрибкового агента для исследуемых дрожжей. Чтобы определить, будет ли противогрибковое средство полезным, также необходимо знать фармакокинетические факторы, такие как абсорбция и распределение препарата в компартментах тела, где находится инфекция, или как быстро он метаболизируется или выводится из организма? Кроме того, необходимо учитывать знание фармакодинамических факторов, таких как желаемое и нежелательное воздействие лекарственного средства на организм или межлекарственные взаимодействия, которые следует учитывать для каждого отдельного пациента. Тем не менее, ECV недикого типа может быть полезен, поскольку он должен дать клиницисту паузу и может предложить осторожность при рассмотрении вопроса о выборе этого конкретного противогрибкового агента, поскольку изолят уже продемонстрировал наличие механизма резистентности посредством повышенный MIC, который выше, чем у нормальной популяции дикого типа этого вида.

Образец ECV дрожжей из CLSI M59

На этом слайде представлена ​​часть данных ECV, доступных из CLSI для противогрибкового агента амфотерицина B против ряда видов Candida . Как видно из этой таблицы, ECV различаются в зависимости от того, какой вид Candida тестируется. Например, Candida albicans с МИК менее или равной 2 мкг/мл будет считаться диким типом, а Candida dubliniensis с МИК выше 0,5 мкг/мл будет считаться недиким типом, что предполагает наличие механизма резистентности. На момент написания этой записи видоспецифичные ECV в настоящее время доступны для наиболее распространенных видов Candida , а также Cryptococcus neoformans , Cryptococcus deuterogatti и Cryptococcus gattii . Дополнительные ECV постоянно рассматриваются организациями, устанавливающими стандарты.

Выводы

Подводя итог сегодняшней презентации, можно сказать, что тестирование чувствительности дрожжей к противогрибковым препаратам — это то, что многие клинические лаборатории могут проводить в плановом порядке, используя стандартизированный метод разбавления бульона. Существуют международные согласованные стандарты CLSI и EUCAST, которые обеспечивают методологию и общепризнанные критерии интерпретации. Для наиболее распространенных видов Candida в отношении эхинокандинов и двух азолов доступны специфические для вида критерии интерпретации. В случаях, когда пограничные значения и критерии интерпретации недоступны, использование эпидемиологических пороговых значений, или ECV, может помочь клиницисту узнать, определяется ли изолят как «дикий тип» или у него есть врожденные или приобретенные механизмы резистентности, которые делают противогрибковые менее эффективны. Ожидается, что со временем станут доступны дополнительные контрольные точки и критерии интерпретации, а также дополнительные ВКлП, поскольку в нескольких лабораториях будет собрано достаточно данных для других родов и видов дрожжей.

Ссылки

Если вы заинтересованы в получении дополнительной информации об испытаниях на чувствительность к противогрибковым препаратам или эпидемиологических пороговых значениях, я включил несколько превосходных статей в конце этой презентации для вашего ознакомления.