Барельеф орхидеи на стене мастер класс: Барельеф орхидеи | Рисуем18

Содержание

Барельеф орхидеи | Рисуем18

Вернуться к списку Online курсов


Онлайн курс «Создание барельефа “Орхидеи”»

Мастер-класс по выполнению гладкого цветка орхидеи из штукатурки на гипсовой основе.

Изображение может быть выполнено на планшете МДФ размером не больше 50х70см
или на стене любого размера.

Для создания барельефа потребуется:

✐ штукатурка на гипсовой основе

✐ МДФ 50х70см или стена

✐ мастихины

✐ грунтовка интерьерная или глубокого проникновения
    можно использовать адгезионнный грунт с песочком

✐ готовая латексная штукатурка

✐ резаки

✐ шкурка мелкое зерно

✐ шкурка нулёвка

✐ краска акриловая

✐ краскопульт для окрашивания (желательно)

✐ фотография с изображением цветов

На МК вы узнаете, как:

✏- подготовить поверхность

✏- замешать штукатурку

✏- создать объём цветов

✏- доработать барельеф резаками

✏- сделать изображение гладким

✏- создать объёмную картину на планшете

В результате вы сможете:

✏- Создавать объёмные цветы из штукатурки на гипсовой основе, на поверхности стены или планшете.

✏- Научитесь работать со штукатуркой на гипсовой основе.

✏- Узнаете о её особенностях и недостатках при выполнении работы на планшете и стене.

✏- Применить полученные знания для выполнения барельефа цветов в различных композициях на стенах и настенных панно.


Для создания любой работы размером от спичечного коробка, до монументального в несколько кв.м., необходимы базовые знания композиции.

Если вам этих знаний не хватает, можете приобрести дополнительные видео уроки по этой теме.

Подробное описание в разделе: Online курсы «Основы композиции».



Стоимость онлайн МК «Барельеф Орхидеи» 10т.р.


Формат обучения: самостоятельный (я вам открою доступ к урокам на ❶ год для самостоятельного изучения),
а также вы можете задавать мне вопросы в контакте

Когда вы решите приобрести любые мои online курсы, перейдите на страницу оплата

Лепной декор из гипса на кухне • орхидея

 

  • Краткое описание: декор кухни гипсовым барельефом в частном интерьере в квартире Санкт-Петербурга
  • Материалы: акриловый грунт, гипсовая штукатурка и шпаклевка, клей ПВА строительный, акриловые краски Tikkurila, флуоресцентные краски
  • Размер: 1,5 кв. метра

Дизайн кухни выполнен в классическом стиле в светлой пастельной цветовой гамме с золотыми декоративными вставками на кухонном гарнитуре, покрытие столешницы и фартука имитируют мраморную поверхность в теплых коричневых оттенках, керамическая плитка на полу в такой же сдержанной цветовой палитре. Благородный интерьер кухни решили дополнить и разбавить строгость оригинальным оформлением стены над обеденным столом, выбор был сделан в пользу гипсового барельефа. Хозяйка кухни заранее определилась с темой, пожеланием было слепить цветок орхидею по диагонали стены, огибая предполагаемое место в центре под телевизор. Асимметрия композиции, крупный масштаб цветов, живая, местами грубая фактура барельефа разбавляет белоснежную «стерильность» интерьера кухни, такой декор – точное попадание для уютной домашней атмосферы.

Основной цвет орхидеи подбирали прямо на месте, я сделала несколько пробных вариантов пастельных оттенков от холодного розового до теплого персикового.


Решили тонировать в любимый хозяйкой кравртиры нежный персиковый цвет с переходом в холодные чуть более темные по тону коричневые цвета в углублениях барельефа, получилось живописное гармоничное сочетание.

Фоновый цвет стен вокруг барельефа изначально хотели оставить белым, но ради эксперимента я попробовала сделать эффект “под старину” и ошиблась 🙂 Действительно, цветок на однотонной белой стене смотрится гораздо лучше, выделяется на его фоне, а эффект старины обедняет пастельные краски орхидеи, поэтому стене я вернула прежний белоснежный вид.

Ещё один вывод, который я сделала из этого эксперимента – чем меньше комната, тем мельче декоративную фактуру стен стоит делать, но это не точно :))) всегда есть исключения 🙂 Нужно всё учитывать: какие еще материалы используются в дизайне и оформлении комнаты: из чего мебель, какой текстиль, какой декор, а для барельефа особенно важно освещение. Часто в ходе работы приходится вносить корректировки, когда выясняются какие-то нюансы, но это нормально и даже хорошо, в этом главное преимущество работ “на заказ” перед готовыми магазинными решениями.

Лепной декор для интерьера | РУЧНАЯ работа

Лепной декор для кухни в СПб

  • Краткое описание: лепной декор для кухни из гипся в частном интерьере в квартире Санкт-Петербурга. Дизайн кухни выполнен в классическом стиле в светлой пастельной цветовой гамме с золотыми декоративными вставками на кухонном гарнитуре, покрытие столешницы и фартука имитируют мраморную поверхность в теплых коричневых оттенках, керамическая плитка на полу в такой же сдержанной цветовой палитре. Благородный интерьер кухни решили дополнить и разбавить строгость оригинальным оформлением стены над обеденным столом, выбор был сделан в пользу гипсового барельефа. Хозяйка кухни заранее определилась с темой, пожеланием было слепить цветок орхидею по диагонали, огибая предполагаемое место в центре под телевизор. Асимметрия композиции, крупный масштаб цветов, живая, местами грубая фактура барельефа разбавляет белоснежную «стерильность» интерьера кухни, такой декор – точное попадание для уютной домашней атмосферы.
  • Материалы: акриловый грунт, гипсовая штукатурка и шпаклевка, клей ПВА строительный, акриловые краски Tikkurila, флуоресцентные краски
  • Размер: 1,5 кв.метра

Основной цвет орхидеи подбирали прямо на месте, я сделала несколько пробных вариантов пастельных оттенков от холодного розового до теплого персикового.


Решили тонировать в любимый хозяйкой кравртиры нежный персиковый цвет с переходом в холодные чуть более темные по тону коричневые цвета в углублениях барельефа, получилось живописное гармоничное сочетание.

Фоновый цвет вокруг барельефа изначально хотели оставить белым, но ради эксперимента я попробовала сделать эффект “под старину” и ошиблась 🙂 Действительно, цветок на однотонной белой стене смотрится гораздо лучше, выделяется на его фоне, а эффект старины обедняет пастельные краски орхидеи, поэтому стене я вернула прежний белоснежный вид.

Ещё один вывод, который я сделала из этого эксперимента – чем меньше комната, тем мельче декоративную фактуру стен стоит делать, но это не точно :))) всегда есть исключения 🙂 Нужно всё учитывать: какие еще материалы используются в дизайне и оформлении комнаты: из чего мебель, какой текстиль, какой декор, а для барельефа особенно важно освещение. Часто в ходе работы приходится вносить корректировки, когда выясняются какие-то нюансы, но это нормально и даже хорошо, в этом главное преимущество лепного декора “на заказ” перед готовыми магазинными решениями.

 


Объемный авторский декор, изготовленный художником из качественного гипса – это всегда креатив. Сейчас при создании интерьера в первую очередь ценится эксклюзивность, непохожесть. Люди стремятся продемонстрировать свою успешность и выразить себя в творческом подходе к оформлению помещения – в квартире, загородном доме, в офисе. Поэтому, для подобного лепного декора приглашается профессиональный художник.

Благодаря мастерству дизайнера с помощью гипсовой лепнины удается превратить неприглядное или просто обычное стандартное пространство в яркое, эксклюзивное помещение. Художник подбирает подходящий вариант с учетом множества факторов, в том числе, в первую очередь, исходя из площади комнаты. Создаются эскизы, которые обсуждаются с заказчиком. При необходимости в них вносятся правки. После утверждения эскиза мастер приступает к работе.

Интерьер с лепным декором

Декоративная лепнина обычно выглядит достаточно объемно, поэтому такие украшения смотрятся наиболее выигрышно в комнатах с достаточно большой площадью. Этот роскошный декор, как никакой другой, требует воздуха, света, высокого потолка и свободного пространства.

Внимание! Если помещение не слишком велико, не стоит огорчаться. Опытный мастер сможет подобрать менее громоздкую, более лаконичную лепнину со строгими и безупречными формами и грамотно вписать ее в имеющийся интерьер. В этом случае ваш гипсовый декор даже в не очень большой гостиной или спальне будет выглядеть вполне органично.

Где уместен лепной декор в интерьере?

Сейчас модную лепнину можно использовать практически в любом помещении, при условии правильного дизайнерского подхода и приемов, то есть применении художником-декоратором профессиональных знаний.

Идеальным местом для лепного декора служит большая гостиная или столовая, спальня или рабочий кабинет в квартире или загородном доме. Прекрасно смотрится этот вид лепных украшений во многих общественных помещениях.

Важно! Не стоит декорировать большие колонны громоздкой лепниной, если в помещении, к примеру, недостаточно широкий проход. В этом случае произойдет визуальное сужение и утяжеление пространства. Подбирать и монтировать объемный декор следует, если высота потолка более двух с половиной или трех метров. Слишком крупная и сложная композиционно лепнина и, вдобавок, массивная (габаритная) люстра «под старину» с обилием громоздких деталей в маленьких комнатах выглядит не гармонично. Это всего лишь несколько примеров.

Нюансов существует великое множество. И только настоящий профессионал, знакомый с правилами создания грамотного интерьера, в совершенстве владеет современными дизайнерскими техниками и сможет выполнить подобную работу.

Применение креативного дизайнерского подхода, опыт и интуиция художника помогают оформить пространство в любом помещении необычно, оригинально, свежо. Лепнина становится запоминающейся деталью интерьера:

  • жилых домов и квартир;
  • общественных зданий и учреждений;
  • фасадов строений;
  • клубов;
  • кафе, баров и ресторанов;
  • кабинета руководителя;
  • престижных выставок;
  • вокзалов и залов ожидания;
  • магазинов и бутиков;
  • салонов красоты и пр.

Художник использует разнообразные рисунки и современные технологии, дающие просто поразительные результаты. Поэтому объемное украшение для любых поверхностей – часто используемый дизайнерский прием во всем мире. Он уместен не только при наличии классического интерьера, но и многих других стилевых решениях и может быть выполнен в виде необычных растений и цветов, лаконичных абстракций и даже сказочных или мифических сюжетов.

Преображенное помещение становится идеальным местом для проживания, отдыха, встреч с друзьями, занятий по интересам, профессиональной деятельности, релакса и т.д.

Отличный результат возможен только при обращении к профессионалу с большим опытом. Настоящий художник-дизайнер владеет многими техниками и имеет соответствующее образование. Он всегда найдет единственно верное решение и предложит различные варианты модного современного декора, включая гипсовую лепнину. Обращение к мастеру гарантировано убережет от распространенных ошибок в оформлении интерьера и некачественно выполненной работы.

Я – художник – Елена Коваленко.

Много лет занимаюсь творческой дизайнерской работой, включая создание авторского интерьера с помощью гипсовых украшений. Моя профессиональная деятельность приносит мне радость, и я готова делиться ею с окружающими.

Лепной декор из гипса в интерьере в СПБ – это выбор настоящих эстетов. Если вы относите себя к таковым, я готова выполнить ваши пожелания.

Стоимость лепного декора

мастер-классов по скульптуре – New York Studio School

Программа «Скульптура» в New York Studio School приглашает учащихся использовать мощный язык материальных материалов. Чтобы создать цель для этого языка, мы переживаем и пересматриваем: массу, пространство, материал, форму, процесс, прикосновение, изображение, цвет, структуру, организацию, баланс, ритм, движение, контекст и отношения.

Наша строгая программа, которую преподает небольшая группа преданных своему делу профессиональных скульпторов, дает возможность объединить процесс, восприятие, исследования и критический диалог. Каждый студент приобретает убежденность в скульптуре и фундамент, на котором его или ее работа может развиваться на протяжении всей жизни.

Курсы послеобеденной скульптуры позволяют участникам учиться и творить вместе с нашими кандидатами на получение сертификата МИД и сертификатом. В осеннем семестре 2021 года Джилэйн Джонс будет проводить курс по средам во второй половине дня с 14:00 до 18:00.

Скульптура: независимые проекты в контексте – с Джилэйн Джонс (Virtual)

среда, 14:00 – 18:00 по восточноевропейскому времени
22 сентября – 15 декабря 2021 г.

Стоимость: $ 925

Описание курса

Этот курс поддержит каждого студента в самостоятельном развитии скульптуры в контексте диалога о скульптурных возможностях и прецедентах.Курс будет проводиться виртуально с использованием Zoom в качестве виртуальной «переговорной комнаты». Хотя их центральный проект в этом курсе должен быть скульптурным, участник не обязательно должен быть в первую очередь скульптором.

Формат открытый: это могут быть единичные конструкции / формы, или инсталляция, или барельеф (со стены). Контекст диалога будет инициирован группой, реагирующей через пропозициональную работу, в диапазоне материалов, на потенциалы скульптуры, представленные Инструктором, которые существуют в отношении пространства и через действие.Оттуда каждый студент будет развивать свое собственное направление, которое может быть основано на этих начальных упражнениях и / или путем обсуждения с инструктором. Какие материалы используются, может зависеть от индивидуального опыта или нет: инструктор может предложить в соответствии с идеей (один или комбинация материалов: картон, смешанные материалы, глина, гипс, металлы, дерево и т. Д.) Скульптура будет развиваться путем погружения в выбранные материалы и обращения с ними: буквально борясь с идеями, а также в контексте диалога и обратной связи.Расширение осведомленности о потенциальных возможностях будет заключаться в обсуждении изображений широкого спектра скульптурных примеров, начиная от догонов в Западной Африке и заканчивая романским и ренессансным стилями в Европе и направлениями конца 20-го века на разных континентах.
Участники могут использовать идеи из истории скульптуры, чтобы расширить или даже начать свою самостоятельную работу. Будет обеспечена удаленная техническая поддержка в зависимости от опыта преподавателя; независимая находчивость также будет частью этого стремления.

Краткое содержание курса

В первые две недели мы будем работать над двумя скульптурными потенциалами; один касается пространства: как его понимают через массу, линейное и реальное пространство; и другое действие: как оно понимается через поведение ряда материалов. После этого мы определим направление проекта для каждого студента, которое может быть прояснено быстро или постепенно. У студентов будет еженедельный индивидуальный диалог с инструктором, а также групповой просмотр выполняемой работы раз в две недели.Каждые две недели мы будем обсуждать образы произведений из истории скульптуры, организованные вокруг преемственности и контрастов. Обсуждение будет включать в себя то, как ряд материалов, каждый из которых обладает определенным поведением и качествами, динамически присущ идеям, как концепции, лежащие в основе структур, возникают и высвобождаются культурой и возможностями переосмысления.

Программа курса

ЗАРЕГИСТРИРОВАТЬСЯ

Orchid Greenhouse I www.OrchidsMadeEasy.com

Выращивание орхидей в теплице – увлекательная задача, которая может оказаться очень полезным занятием.Немного спланировав, вы можете построить оранжерею своей мечты, где сможете продемонстрировать свою прекрасную коллекцию орхидей своей семье и друзьям.

Что касается теплиц для орхидей… какие у меня варианты?

Когда вы начинаете поиски идеальной теплицы для вас, вы должны сначала подумать о том, какой тип теплицы вы хотели бы получить. Выделяют три основных типа:

    (1) Первый тип – это пристройка, обычно небольшая, одна из длинных сторон которой прилегает к дому, к которому она прикреплена.Присадки, как правило, недороги, и их не так легко контролировать по температуре, как теплицы других типов.

    (2) Второй тип теплицы присоединяется к вашему дому или подсоединяется к нему. Они обычно больше, чем навесы, и в них также легче контролировать температуру и вентиляцию.

    (3) Третий тип теплицы, который следует рассмотреть, – это отдельно стоящая теплица, которая ни к чему не подключена. В зависимости от того, какой размер вы хотите построить, эти типы теплиц могут быть довольно дорогими, но они предлагают лучший контроль света, температуры и вентиляции.

Я выбрал свой тип теплицы… что теперь?

После выбора типа теплицы, которую вы хотите приобрести, следующим шагом будет выбор идеального места, где ваша теплица будет получать оптимальное количество солнечного света. При выборе места необходимо учитывать несколько вещей. Вы не захотите размещать теплицу на северной стороне вашего дома, потому что зимой будет слишком холодно, и вам нужно быть осторожным, чтобы убедиться, что в выбранном вами месте полуденное солнце не блокируется деревьями или другими предметами. большие конструкции.

Некоторые из идеальных мест: север-юг, восток-запад или юго-восток-северо-восток. Если вы выбрали отдельно стоящие теплицы, они хорошо себя чувствуют при ориентации с севера на юг, тогда как навесные и пристроенные теплицы хорошо подходят для ориентации на восток или юг, чтобы они могли получить максимальное воздействие.

Еще кое-что, что вы можете захотеть рассмотреть при поиске идеального места для теплицы, – это легкий доступ к водопроводному крану.

Контроль температуры

Есть несколько способов контролировать температуру в теплице.Вы можете постоянно держать в теплице термометр, чтобы вы могли внимательно следить за температурой, чтобы убедиться, что ваши орхидеи не становятся слишком горячими или слишком холодными. Система отопления необходима, если вы живете в районе, где температура опускается ниже 45 ° F (7,2 ° C). Существует множество различных вариантов отопления, включая паровое, солнечное, циркуляционное горячее водоснабжение, природный газ и некоторые другие. С другой стороны, если вы не живете в очень жаркой местности или не выращиваете орхидеи с прохладной температурой, вам, вероятно, не понадобится какая-либо система охлаждения.

Вентиляция

Также очень важно следить за тем, чтобы орхидеи получали достаточную вентиляцию. Это важно, чтобы у ваших орхидей не образовалась корневая гниль и болезни. Вы можете добиться необходимой вентиляции с помощью качающихся вентиляторов или встроенных вентиляционных отверстий по бокам и на крыше теплицы.

Прочие соображения…

Чтобы успешно выращивать орхидеи в теплице, вам необходимо обеспечить надлежащий уровень влажности. Чтобы повысить уровень влажности в теплице, вы можете установить блок влажности или установить мистеры, которые работают по таймеру.

Показ вашей коллекции орхидей…

Есть много разных способов разместить орхидеи в теплице. Один из таких способов – поставить скамейку для орхидей. Эти скамейки могут быть изготовлены из любых материалов, таких как пластик, дерево или сталь. При выборе скамейки важно помнить о том, чтобы подобрать такую ​​скамейку, которая будет обеспечивать достаточный приток воздуха к корням, а также обеспечить надлежащий дренаж, чтобы корни орхидеи никогда не оказывались в луже с водой.

Скамейки

могут быть одноярусными, двухъярусными или трехъярусными. Если вы выберете многоярусную скамейку, вам нужно будет следить за тем, чтобы на дне оставались только те орхидеи, которые слабо освещены, потому что на эти орхидеи не попадет очень много света. Кроме того, важно иметь водоотражатель, чтобы вода не капала с орхидей сверху вниз на орхидеи, уставшие снизу, потому что это хороший способ заразить гниль кроны или распространить болезнь.

Еще один способ показать свои орхидеи – повесить их, особенно если вы выращиваете орхидеи Ванда с очень длинной корневой системой.Вы можете повесить орхидеи на горшках, корзинах или прикрепить настенный дисплей к стене с помощью проволоки или сетки.

Поскольку в теплице гораздо легче контролировать количество света, температуру, влажность и движение воздуха, чем в доме, выращивание орхидей в теплице может быть намного проще для многих людей. Выращивание орхидеи в теплице может быть очень приятным занятием, если вы будете вознаграждены красивыми цветками орхидей.

Следующие шаги: куда вы пойдете дальше?

Пара вариантов:

# 1 – Больше бесплатных советов по орхидеям!
Как минимум, я настоятельно рекомендую подписаться на нашу рассылку с советами по орхидеям (это бесплатно!). Это даст вам несколько дополнительных (более подробных) пошаговых советов, которые вы можете сразу же начать использовать со своими орхидеями…

# 2 – Получите доступ ко ВСЕМ моим статьям об орхидеях…
Если вы хотите узнать все, вам нужно знать об уходе за ВСЕМИ типами орхидей, у нас также есть что-то, называемое Клубом зеленого пальца Orchids Made Easy.

Green Thumb Club включает в себя ряд различных преимуществ, в том числе еженедельные уроки по всем различным темам ухода за орхидеями, которые проводятся в специальной защищенной паролем зоне для участников.У вас также есть возможность получить ответы на ВАШИ актуальные вопросы в моей еженедельной колонке «Спросите парня-орхидеи», которую вы можете проверить здесь.

The Green Thumb Club стоит меньше, чем еда в McDonald’s – и ТАКЖЕ включает в себя всевозможные ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ преимущества, в том числе эксклюзивные скидки у поставщиков орхидей от 20-40%, а также доступ к нашему «инструменту диагностики орхидей», который поможет вам определить, в чем проблема. может преследовать ваше растение.

Поскольку клуб имеет полную 100% гарантию возврата денег в течение полных 30 дней, если после проверки вы решите, что это не для вас или что вы не получили ценности от того, чему вы научились, – нет проблем. ! Просто отправьте нам электронное письмо, чтобы сообщить мне об этом, и вы получите быстрый и вежливый возврат.Скажем так: если вы не счастливы, я не счастлив!

(Кстати, по этой ссылке вы получите скидку 50% от стоимости членства. Небольшой «подарок» за прочтение этой статьи до конца :-))

Всего наилучшего,

Райан «Парень из орхидей» 🙂


ВАЖНО: Чтобы узнать все, что вам нужно знать об уходе за орхидеями, если вы еще этого не сделали, я настоятельно рекомендую подписаться на «Информационный бюллетень по уходу за орхидеями и секреты» мы с женой публикуем нажав здесь.

Это совершенно бесплатно – и что самое интересное? Вы даже можете выбрать тип информации, которую хотите получать (советы по изменению цветения, основы ухода за орхидеями и т. Д.). Присоединяйтесь к более чем 20 000 молодых и старых любителей орхидей и подпишитесь на нашу бесплатную рассылку по уходу за орхидеями сегодня! 🙂

Ошибка гибридного подключения: не удалось найти разъем

Psst … Эй, вам понравилась эта статья или есть вопрос? Я хотел бы получить известие от вас! Пожалуйста, нажмите НРАВИТСЯ и оставьте комментарий ниже, чтобы сообщить мне!

Оставьте комментарий ниже:

микроРНК, связанных со стимулированием роста, в корнях орхидей онцидиум, колонизированных эндофитным грибком Piriformospora indica

Цитата: Ye W, Shen CH, Lin Y, Chen PJ, Xu X, Oelmüller R, et al. .(2014) Связанные со стимулированием роста миРНК в Oncidium Корнях орхидей, колонизированных эндофитным грибком Piriformospora indica . PLoS ONE 9 (1): e84920. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084920

Редактор: Малкольм Беннет, Ноттингемский университет, Великобритания

Поступила: 22 августа 2013 г .; Одобрена: 20 ноября 2013 г .; Опубликован: 7 января 2014 г.

Авторские права: © 2014 Ye et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Работа поддержана фондом Национального научного совета в рамках проекта NSC -101-2324-B-002-023-CC2 доктору Кай-Вун Йе. Эта работа также финансировалась Национальным фондом естественных наук Китая (31078717, 31272149 и 31201614), Программой докторантуры высшего образования Министерства образования Китая (20093515110005 и 20123515120008) и Китайским фондом естественных наук провинции Фуцзянь (2012J05042 ).Авторы также благодарны за поддержку проекта PPP, 2013 как NSC, Тайвань, так и DAAD, Германия. Эта работа также финансировалась Проектом строительства научно-технической платформы провинции Фуцзянь (2008N2001). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Piriformospora indica , эндофит, колонизирующий корни, с широким кругом хозяев, интенсивно изучается из-за его разнообразного положительного воздействия на продуктивность как однодольных, так и эвдикотовых растений. P. indica улучшает усвоение питательных веществ растениями-хозяевами [1], [2], повышает их устойчивость к биотическим и абиотическим стрессам [3] – [6], способствует увеличению биомассы надземной и подземной частей [7] а также накопление вторичных метаболитов с последующей зависимой от клеточной гибели фазой, и этот образ жизни имеет решающее значение для местной и системной резистентности, вызванной P. indica [6], [8] – [11]. Поскольку гриб легко культивировать без хозяина, он стал модельным организмом для изучения симбиотических корневых взаимодействий [3].Протеомика и транскриптомика были использованы для изучения взаимодействия P. indica с Arabidopsis thaliana и ячменя, а также для стадийно-зависимых белков и генов, участвующих в метаболизме фитогормонов [11], [12] и мембранных белков. синтеза [13]. P. indica также способствует росту китайской капусты ( Brassica campestris subsp. chinensis ). Анализ библиотеки кДНК EST с двойным вычитанием выявил гены, связанные с биосинтезом ауксина и передачей сигналов, что указывает на то, что этот фитогормон может иметь решающее значение для китайской капусты / P.Indica симбиоз [14].

Орхидея Онцидиум , также известная как «орхидея танцующей леди», является одним из самых важных горшечных и срезанных цветов на Тайване, Юго-Восточной Азии и Китае. Онцидиум принадлежит к эпифитным орхидеям, известным своей медленной скоростью роста. От стадии всходов до цветения им требуется 2–3 года [15]. Кроме того, самый продаваемый сорт Onc. «Gower Ramsey» ( Onc. GR) очень восприимчив к болезни мягкой гнили ( Erwinia carotovora ) [16].Поскольку большинство коммерческих сортов онцидиума являются самонесовместимыми [17], [18] или демонстрируют высокую стерильность, которая препятствует селекции путем перекрестной гибридизации, необходимо улучшить новые сорта, чтобы преодолеть эти проблемы. Хотя техника трансформации генов для улучшения свойства сорта Oncidium была разработана [19] – [21], эта технология сильно зависит от доступной информации о генетике Oncidium . Недавно был достигнут некоторый прогресс в отношении времени цветения Oncidium [22] – [26] и биосинтеза пигментов [19], [20], [27], [28], но мало что известно о регуляции роста и болезнях. устойчивость у орхидей.Мы наблюдали, что колонизация корней Oncidium P. indica приводит к стимулированию роста, аналогичному результатам, полученным для китайской капусты и других видов растений. P. indica филогенетически родственен грибам, изолированным из ризосферы орхидей, и полезен для прорастания семян орхидей в vitro [29]. Однако лежащие в основе молекулярные механизмы установления и поддержания симбиоза практически не изучены. Идентификация генов, отвечающих на колонизацию, может помочь выяснить молекулярные основы роста и развития орхидей.

Недавние данные показывают, что микроРНК (miRNAs) играют важную роль во взаимодействии между растениями и почвенными микробами [30]. MiRNA представляют собой класс эндогенных малых некодирующих РНК, часто длиной 20–22 нуклеотидов, которые регулируют экспрессию генов, опосредуя подавление генов на транскрипционном (TGS) и посттранскрипционном (PTGS) уровнях, включая модификацию гистонов, метилирование ДНК, силирование РНК. и трансляционная репрессия [31], [32]. Они играют важную роль во многих процессах растений, включая развитие, дифференциацию и реакцию на биотические и абиотические стрессы [32] – [39].Более того, miRNAs быстро активируются в ответ на ранение и другие стрессовые стимулы [40]. Биогенез и механизм действия miRNAs подробно рассмотрены [39], [41].

miRNAs распознают свои мишени мРНК на основе почти идеальной комплементарности и подавляют экспрессию генов-мишеней, управляя деградацией или репрессией трансляции родственных мишеней мРНК [42]. Более того, они, как правило, в значительной степени действуют как «ранние» регуляторы передачи сигнала, работая на уровне фактора транскрипции (TF) в различных системах [43], [44].Во время симбиоза miRNAs участвуют в регуляции баланса питания растений [45], [46], гормонального гомеостаза и передачи сигналов [47], а также в пространственном и временном развитии симбиотических клубеньков [48], [49]. MiRNA могут быстро реагировать на заражение симбиотическими бактериями. В корнях сои было обнаружено, что набор miRNAs интенсивно активируется или подавляется инфекцией ризобиальной бактерией Brodyrnia japonicum , где они нацелены на широкий спектр мРНК [47], [49].

Традиционное клонирование и изучение miRNA основывается на технологии клонирования, которая трудоемка и малоэффективна.Благодаря развитию технологии последовательностей следующего поколения обнаружение miRNA в масштабе всего генома стало намного проще. Более того, количество считываний унигенов среди различных библиотек помогает оценить уровень экспрессии отдельной малой РНК [50]. Здесь мы использовали высокопроизводительную технологию для изучения miRNA в корнях орхидеи Oncidium , колонизированной или не колонизированной P. indica . Идентифицировано большое количество консервативных и новых miRNA. Предсказанные гены-мишени этих miRNA были в основном каталогизированы для восприятия и трансдукции сигнала фитогормона, факторов транскрипции, вторичных метаболитов и механизмов защиты растений.Это исследование было сосредоточено на идентификации и характеристике консервативных и новых микроРНК. Были идентифицированы транскрипты-мишени около микроРНК Oncidium . Данные показали, что идентифицированные miRNA могут участвовать в создании сложной сети, которая регулирует рост растений, развитие корней и защиту. Это исследование может помочь понять молекулярные основы симбиотического взаимодействия P. indica с орхидеями.

Результаты

Эффект

P.индика на Онцидиум GR Рост и развитие корней

Чтобы понять симбиотическое взаимодействие между Oncidium GR и P. indica , ткань корня была проанализирована после колонизации грибами. P. indica проник в эпидермальные слои корня через 24 часа после инокуляции (рис. 1B – D). Через пять дней после инокуляции гифы были широко распределены по поверхности корня, и не наблюдалось значительной разницы между верхушкой корня, зоной удлинения и зоной дифференцировки (рис. 1E).Этот случай отличается от A. thaliana [6], [51] и ячменя [10], где гифы преимущественно колонизировали зону дифференцировки. Поперечные и продольные срезы показывают, что гифы полностью колонизировали веламен (рис. 1F, H). Поскольку веламен и экзодерма не содержат пластид, гифы были легко обнаружены после визуализации с помощью связывающего углеводы лектина конканавалина A-AF633 (conA-633) (рис. 1H). Более того, в отличие от других эндофитных грибов, которые проникают в клетки коры через экзодерму [52], гифы не были обнаружены в экзодерме и слое коры головного мозга Oncidium , даже после относительно длительного периода совместного культивирования (8 недель).Это предполагает, что P. indica может преимущественно колонизировать мертвые клетки в Oncidium , что согласуется с данными о ячмене, где массовое развитие P. indica происходит в мертвых клетках-хозяевах [10].

Рис. 1. Эффекты роста P. indica на орхидее Oncidium .

(A) Сеянцы, инокулированные P. indica в течение 8 недель, показали значительно усиленный рост и развитие корней. (B – D) Анатомические структуры корней, заселенных P.индика в течение 24 часов. Гифы (зеленые точки в B, острие стрелки) и место проникновения (красные пятна в C, острие стрелки) были наложены в ярком поле (D, острие стрелки). Пруток = 50 мкм. (E) Микроскопическая структура корней, колонизированных P. indica в течение 5 дней. Большое количество гиф было распространено по поверхности и верхушке корня, зоне растяжения и зоне зрелости. Бар = 200 мкм. (F, G) Микроскопические структуры поперечных и продольных срезов корней, колонизированных P.indica в течение 5 дней.Гифы полностью заселили веламен. Автофлуоресценция хлоропластов (красный цвет) также была обнаружена в коре головного мозга. Бар = 200 мкм. (H) Микроскопические структуры поперечного среза корней, колонизированных P. indica в течение 5 дней. P. indica был ограничен в веламене и не обнаруживался в экзодерме корней Oncidium . В коре головного мозга обнаружена автофлуоресценция хлоропластов (красный цвет). Пруток = 50 мкм. (I) Микрофотография поперечных срезов корней проростков, колонизированных P. indica в течение 5 дней.Без флуоресценции хлорофилла в веламене четко выявлялись места проникновения (красное пятно). Пруток = 20 мкм. (J) Количественная оценка роста проростков, колонизированных P. indica в течение 8 недель. Анализировали свежий вес, высоту растения, количество листьев, ширину листа, диаметр стебля, количество и диаметр корней. Планки погрешностей представляют собой стандартное отклонение для трех независимых экспериментов. *, P значение <0,05; **, P <0,001. Гифы окрашивали хитин-специфичным WGA-AF488 (зеленый). Проникшие участки (Ps) окрашивали лектин-специфическим conA-AF633 (красный) [88].Образцы анализировали и фотографировали с помощью системы инвертированного микроскопа Olympus IX71 (Япония). Вэ, веламен; EX, экзодерма; Кортикальный слой: кора головного мозга; Ch: Хлоропласт. Hy, гифы; Ps, сайт проникновения.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084920.g001

Через восемь недель после инокуляции стебли и корни развиваются лучше, чем у орхидей без совместного культивирования P. indica . Кроме того, некротических повреждений не наблюдалось (рис. 1А). При заселении г.indica , свежая масса проростков орхидеи в 2 раза выше, чем неокультивированных контрольных сеянцев. Также количество листьев было больше, а диаметр стебля был немного толще по сравнению с контролем. Количество корней заметно увеличилось примерно в 2 раза, а диаметр главного корня увеличился в 1-2 раза. Эти результаты показали, что установление полезного симбиоза происходит относительно медленно и в основном вызвано увеличением биомассы корней.

Секвенирование малой РНК из корней

Oncidium после совместного культивирования с P.индика

Корни, колонизированные или не колонизированные P. indica в течение 8 недель, были выбраны для секвенирования малых РНК. Этот момент времени был проанализирован, потому что виден стимулирующий рост грибок эффект. После удаления низкокачественного загрязнителя и считывания адаптера было получено 24 570 250 и 24 744 141 чистая последовательность считывания из библиотек контрольных и колонизированных корней (номер доступа: SRP031471). Последовательности чистого чтения составили 97,15% и 99,66% всех операций чтения соответственно.Их длина составляет от 13 до 30 нуклеотидов (нуклеотидов). Малые РНК от 20 до 24 нуклеотидов представляли 95,02% и 75,66%, соответственно, всех малых РНК, что указывает на то, что обе библиотеки имеют высокое качество и могут быть использованы для дальнейших исследований miRNA.

Для обеих библиотек было получено 17 036 953 уникальных последовательности из 49 314 391 чистого чтения. Из них 62,56% были специфичны для контрольных корней, 27,47% были специфичны для библиотеки из колонизированных корней P. indica и 9.97% перекрываются в обеих библиотеках. После сопоставления с базами данных Rfam 10.1 и Genbank рРНК, мяРНК и другие некодирующие последовательности РНК были удалены. Остальные 43 190 и 33 619 уникальных последовательностей в двух библиотеках рассматривались как потенциальные miRNA. Однако большинство оставшихся уникальных последовательностей все еще не аннотированы. На их долю приходилось 99,09% и 97,40% в двух библиотеках соответственно (таблица 1). Высокий процент неаннотированных малых РНК в основном связан с недостаточной геномной информацией орхидеи Oncidium .

Идентификация консервативных миРНК в корнях

Oncidium Орхидея, колонизированная или имитирующая P . индика

Для идентификации консервативных miRNA, содержащие от 20 до 24 нуклеотидов были сопоставлены со всеми известными зрелыми miRNA из растений в банке данных miRBase 19.0 (значение E = 1). Последовательности с различиями более 4 нуклеотидов удаляли. Впоследствии 2789 из 17 036953 уникальных последовательностей из обеих библиотек показали гомологию с 86 семействами миРНК, распределенными у 41 вида (Таблица S2).В основном они встречаются в Cucumis melo, Malus domestica , Saccharum ssp . И Brachypodium distachyon (Рисунок S2). Более того, хорошо известно, что цепи miRNA *, связанные с Ago1, обычно генерируют miRNA, начиная с уридина, тогда как miRNA *, связанная с Ago2, обычно начинается с цитидина [53]. В наших двух библиотеках наиболее консервативные miRNA начинаются с буквы «U» (рисунок S3), что указывает на то, что miRNA в корнях Oncidium в основном регулируются Ago1.

Подавляющее большинство и наиболее широко консервативные miRNA присутствовали в обеих библиотеках, а количество miRNA, детектируемых только в одной из двух библиотек, было низким (Таблица S2).В обеих библиотеках обнаружено 1605 miRNA, принадлежащих 62 семействам. Только в библиотеке из колонизированных корней P. indica обнаружено 1083 миРНК, принадлежащих 56 семействам. 101 miРНК, принадлежащая 31 семейству, обнаружена только в библиотеке из контрольных корней. МикроРНК, специфически обнаруженные в библиотеке из колонизированных корней P. indica , были mir158a (t0035494; 41 считывание), mir166l (t0039545; 36 считываний) и mir528 (t0043631; 33 считывания). Число считываний тех микроРНК, которые специфически экспрессируются в P.Indica предполагает, что их накопление невелико (Таблица S2). Таким образом, микроРНК, специфически экспрессируемые в библиотеке колонизированных корней P. indica , трудно обнаружить и могут не оказывать значительного влияния на анализ консервативных миРНК. Эти результаты аналогичны результатам, полученным для патогенного гриба растений Sclerotinia sclerotiorum [54], в котором количество низкоэкспрессируемых консервативных и специфичных miRNA также было низким. Кроме того, количество консервативных miRNA в контрольной библиотеке было намного меньше, чем в библиотеке, полученной из P.indica – колонизированные корни. Это были miRNA 397 (CK0328724; 6 считываний), miRNA 171 (CK0347435; 6 считываний) и miRNA 169 (CK0450655; 5 считываний).

С другой стороны, количество считываний консервативных семейств miRNA, обычно встречающихся в обеих библиотеках, показало значительные различия между двумя библиотеками. Например, наиболее распространенное семейство mir528 генерировало 21287,27 TPM (раз на миллион) в колонизированной библиотеке P. indica и только 3587,79 TPM в контрольной библиотеке. Все 20 основных семейств miRNA, включая miR156 и miR528, были значительно активированы в P.Indica -колонизированная библиотека (таблица 2). Напротив, несколько семейств miRNA, таких как miR169, miR396, miR319, mir160 и mir5648, были подавлены в библиотеке, колонизированной P. indica , по сравнению с контрольной библиотекой (Таблица 2).

Идентификация новых миРНК в корнях ±

P . индика – колонизированная Онцидиум Орхидея

Поскольку полная последовательность генома Oncidium GR или любой другой орхидеи недоступна, поиск потенциальных новых miRNA проводился в базе данных транскриптомов Oncidium GR (http: // predictor.nchu.edu.tw/oogb/) [26]. Вторичную структуру предшественников miRNA и сайтов расщепления дисера предсказывали с помощью программного обеспечения Mireap. Было обнаружено 46 предполагаемых miRNA и 51 предшественник. Среди них 7 предполагаемых miRNA, в том числе New 2 , New 8, New 11, New 12, New 17 , New 21 и New 44 , были обнаружены в обеих библиотеках. Интересно, что 3 предполагаемых miRNA ( New 9, New 10 и New 25 ) детектируются конкретно в P.Indica -колонизированные библиотеки были идентичны по нуклеотидной последовательности, но различались по своим предшественникам. Аналогичные результаты были получены для новелла11 , новелла12 и новелла44 (Таблица S3).

Эти потенциальные новые miRNA имели длину от 20 до 23 нуклеотидов. Подобно консервативным miRNAs, большинство (65,21%) этих новых miRNAs начинается с буквы «U», указывающей на то, что они были связаны и процессируются с помощью AGO1 [53]. Структуры «стебель-петля» потенциальных предшественников предполагаемых miRNA были проанализированы на предмет структуры РНК (Рисунок S4).Минимальные значения свободной энергии составляли от 21,4 до 127,1 ккал / моль, а среднее значение – 49,99 ккал / моль.

Предполагаемые новые miRNA показали гораздо меньшее число считываний, чем у консервативных miRNA. 46 предполагаемых miRNA генерировали только 175,09 TPM и 270,53 TPM в обеих библиотеках, соответственно. Наиболее часто обнаруживаемая предполагаемая miRNA была New11 , которая, как предполагалось, генерировалась из нескольких различных предшественников и также называлась New12 и New44 .В целом они экспрессировались с 50,88 TPM в контрольной библиотеке, но были подавлены с 3,71 TPM в библиотеке, колонизированной P. indica . Предсказанный ген-мишень был либо CC-NBS-LRR (Unigene38669), либо rp1-подобным белком (JL929550.1) (Таблица S3), предполагая, что они могут играть роль в запуске иммунитета растений [55], [56]. Второй предполагаемой miRNA была New 9 , которая генерировала 49,43 TPM, в частности, в библиотеке, колонизированной P. indica . Также было предсказано, что он будет генерироваться из нескольких различных предшественников, а также назван New 10 и New 25 .Предсказанный ген-мишень, кодирующий протеинкиназу (JL915652.1 или JL916309.1), может участвовать в широком диапазоне симбиотических процессов [57] (Таблица S3).

Предсказание генов-мишеней miRNA

Чтобы понять регуляторную функцию miRNAs во время симбиоза, те miRNAs, которые в большом количестве обнаруживаются и значительно повышаются / понижаются с помощью P . индика были выбраны для дальнейшего исследования. 1834 консервативных miRNA, принадлежащих к 26 семействам, были отобраны для предсказания целевого гена.Из-за ограниченной информации о геноме информация из базы данных мРНК Oncidium [26] была дополнена информацией из базы данных мРНК из Oryza sativa и A. thaliana . После выравнивания в psRNAtarget было получено 702 наиболее подходящих целевых кандидата (таблица S4).

Впоследствии аннотации и анализ GO были выполнены Blast 2 GO. 653 цели были аннотированы и распределены по 38 категориям (Таблица S4). В подкатегории биологических процессов гены-мишени в основном участвовали в развитии корней, защите, передаче сигналов, опосредованной гормонами, гибели клеток и клеточном цикле (рис. 2).В подкатегории молекулярной функции гены-мишени в основном связаны с метаболизмом аминокислот, вторичными метаболитами, киназами, эпигенетическими и посттранскрипционными модификациями, окислительно-восстановительной регуляцией и переносчиками (рис. 2). В подкатегории клеточных компонентов были обнаружены гены-мишени, принадлежащие комплексу I дыхательной цепи митохондрий, гетеротримерному комплексу G-белков, интегральным мембранным белкам эндоплазматического ретикулума и белкам хлоропластов (рис. 2). В сочетании с количеством считываний (таблица S5) предсказано, что наиболее распространенные miRNA нацелены на гены, участвующие в развитии корня, такие как mir535, mir156, mir166, mir168, mir393, mir894 (таблица 3).Другие связаны с передачей сигналов ауксина, такие как mir164 и mir167 (Таблица 3). Другая группа miRNAs, такая как mir528, mir397, mir408, может нацеливаться на гены, участвующие в метаболизме клеточной стенки и окислительно-восстановительной регуляции (Таблица 3). Впоследствии мы выбрали некоторые репрезентативные miRNAs для идентификации предсказанных мишеней, изучив транскриптомную базу данных Oncidium GR (таблица S6). Результаты показали, что большинство прогнозируемых генов-мишеней консервативных miRNA согласовывались с результатами, полученными с использованием O.sativa и A. thaliana баз данных мРНК, но некоторые miRNA, такие как mir528, которая была обнаружена только в однодольных, предполагалось, что нацелены на разные гены в каждой из трех баз данных. Например, цели mir528 были предсказаны как FAR1 (NM_119978.3), DUF3444 (NM_001084639.1) и VTE1 (NM_119430.4) в базе данных A. thaliana ; но они были предсказаны как пластоцианин-подобный белок (LOC_Os08g04310.1), предшественник лакказы (LOC_Os01g44330.1), белок Cu / Zn-SOD (LOC_Os08g44770.1,2), мульти-оксидаза меди (LOC_Os01g03620.1) и предшественник L-аскорбатоксидазы (LOC_Os06g37150.1) [58] – [63] в O. sativa база данных. Однако α-лактатдегидрогеназа (JL926279.1), субъединица альфа компонента пируватдегидрогеназы e1 (Unigene38362), белок, подобный белку 13 F-бокса (Unigene13132) и белок, содержащий тетратрикопептидный повтор (Unigene39801), были предсказаны как гены-мишени для mir528. в транскриптомной базе данных Oncidium GR.Аналогичные результаты были получены для mir390, который, как предполагалось, нацелен на LRR-киназу в базе данных транскриптомов Oncidium GR, но предсказывался как TSA3 в базе данных мРНК A. thaliana .

Рисунок 2. GO анализ консервативных кандидатов-мишеней miRNA.

Потенциальные мишени для miRNAs были предсказаны с помощью psRNATarget путем сопоставления с мРНК из Oncidium, Oryza stativa и A. thaliana . Лучшие результаты были выбраны и аннотированы с помощью Blast 2 GO.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084920.g002

Таким образом, предсказание генов-мишеней показало, что miRNA в P . indica – колонизированные корни Oncidium могут регулировать широкий спектр молекулярных процессов. В частности, были идентифицированы белки, участвующие в передаче сигналов и развитии ауксина (Таблица 3). Было показано, что ауксин играет решающую роль в опосредованном P. indica стимулировании роста и развития корней китайской капусты [14], [64].Это означает, что miRNAs играют важную роль в регуляции стимуляции роста во время симбиоза Oncidium и P. indica .

Паттерны экспрессии miRNA и их предполагаемые мишени в

P . индика –колонизированные корни

Чтобы выяснить регуляторную функцию miRNA в отношении их предполагаемых мишеней, была проведена количественная ПЦР в реальном времени (qPCR) для исследования уровней экспрессии в разные периоды после колонизации P.Индика . Большинство консервативных miRNA можно было обнаружить с помощью кПЦР (рис. 3). Члены того же семейства показали сходный паттерн экспрессии в кПЦР, такой как mir156s, mir535s и mir528s. Более того, в соответствии с биоинформатическими данными глубокого секвенирования, наиболее распространенные miRNA, такие как mir528 и mir156b, не показали более высокого уровня экспрессии, чем другие miRNA. Напротив, mir894, mir535a, mir166a, mir166h, mir167, mir168, mir397 и mir2950 показали более высокие уровни экспрессии в ткани корня P. indica , инфицированной Oncidium (рис. 3).Несколько консервативных miRNA с низким числом считываний едва ли могут быть обнаружены в анализе qPCR. Эти результаты показали, что данные qPCR в значительной степени соответствуют данным числа считываний при глубоком секвенировании.

Рисунок 3. Анализ экспрессии микроРНК в орхидее Oncidium ± P. indica с помощью кПЦР.

Корни колонизированы ± P. indica в течение 8 недель. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для 3 повторов и нормализации по 5,8S рРНК. e представляет десятичную точку.* обозначает антисмысловую цепь; № P. ind i ca указывает на то, что новые miRNAs были специфически обнаружены в -P. Индика библиотека орхидей. P. indica указывает на то, что новые miRNA были специфически обнаружены в библиотеке орхидей + P. indica .

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084920.g003

Впоследствии мы использовали qPCR для изучения паттерна экспрессии генов-мишеней miRNA во время симбиотического процесса.Среди предполагаемых мишеней мРНК для компонентов передачи сигнала ауксина показали значительные изменения (Рисунок 4). МРНК для белка рецептора ауксина TIR1, мишени для mir393, показала постепенное снижение регуляции от 0 до 8 недель. Уровень мРНК для факторов ответа на ауксин (ARF), мишеней для mir160, был повышен в течение первой недели с последующим понижением регуляции между 3 и 8 неделей. Мы не смогли обнаружить две ARF, , тип 6 и 8, мишени mir167, в нашем анализе qPCR, что позволяет предположить, что количество транскриптов низкое.Считается, что ARF играют ключевую роль в регуляции сигнального пути ауксина, положительно или отрицательно, и они участвуют в гомеостазе ауксина, конъюгируя свободный ауксин через Gh4 [65].

Рисунок 4. Анализ экспрессии генов-мишеней miRNA с помощью кПЦР.

Из корней, колонизированных P. indica в течение 0, 1, 3 и 8 недель, брали пробы и анализировали уровень экспрессии мРНК с помощью кПЦР. Данные представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для 3 повторов и были нормализованы до уровня мРНК Actin .

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084920.g004

Растениям нужен «цикл перепрограммирования», чтобы регулировать рост и развитие во время симбиотического процесса [66]. Уровень мРНК, участвующий в развитии, например, для связывающего с промотором сквамоза белка, SPL, AGO1 и фактора транскрипции гомеобокса-лейциновой молнии класса III (PHV; факторы транскрипции HD-ZIP III), регулировался mir156 / mir529, mir168 и mir166 соответственно [67]. Их экспрессия снижалась с 1 -й недели до 3-й недели с последующим усилением на 8-й -й неделе (фиг. 4).По-видимому, эти мРНК сначала репрессируются, а затем стимулируются. Другая мРНК, кодирующая Nuclear Factor Y ( NTFY ), регулируемая mir169, которая является критической для развития симбиотических клубеньков [48], была активирована во время ранних периодов колонизации и снижалась позже (Рисунок 4).

Кроме того, гены, связанные с метаболизмом клеточной стенки, такие как лакказа ( LAC ), на которую нацелен mir397, были активированы в течение 1 -й недели , прежде чем они вернулись к нормальному уровню между 3 -м днем. и 8 неделя (рисунок 4).Несколько генов LRR-киназы ( LRR ), которые являются мишенями для mir390, подверглись подавлению после колонизации. Гены F-box , мишени для mir2950, ​​также подвергались подавлению между 1 и 3 неделей с последующими нормальными уровнями на 8-й неделе (фиг. 4). LRR-киназы [68] и белки F-бокса [69] происходят из больших семейств генов, и эти белки участвуют во многих различных биологических процессах, поэтому точная функция этих генов во время симбиоза требует дальнейшего изучения.

Принимая во внимание, что эти мишени были значительно активированы или подавлены, и miRNAs были обильно обнаружены при высокопроизводительном секвенировании, интересно изучить взаимодействие между miRNAs и их мишенями. Полное понимание физиологической функции этих miRNAs и мишеней во время симбиоза может помочь разгадать их роли в симбиозе.

Обсуждение

Глубокое секвенирование миРНК в корнях онцидиума

стр.indica колонизирует корни широкого круга хозяев, тем самым способствуя росту и продуктивности растений [7]. Это часто связано с изменениями в корневой архитектуре [13]. В этом исследовании мы демонстрируем, что свежий вес проростков Oncidium был значительно увеличен после 8 недель совместного культивирования с грибком, что включает большее количество листьев, больший диаметр стебля, увеличение количества корней и диаметра корня и большая высота всходов (рисунок 1). Из-за медленного роста орхидей, эффект стимуляции роста имеет практическое значение для коммерческих целей.Сообщается, что P. indica выделен из ризосферы кустарников Zizyphus nummularia и Prosopis juliflora в пустыне Индии [3]. Он тесно связан с многоядерными грибами Rhizoctonia и Sebacinales, , которые естественным образом связаны с различными растениями орхидей и способны способствовать прорастанию семян орхидей [29]. Здесь мы представляем доказательства того, что P. indica способствует росту как надземной части, так и корней орхидей.

Целью данной работы является понимание функций и регуляторных механизмов miRNAs в регуляции роста орхидей Oncidium во время симбиоза с P. indica . Были проведены высокопроизводительное секвенирование и сравнительный анализ экспрессии. В общей сложности было получено 17 036 953 уникальных последовательностей из 24 570 250 и 24 744 141 чистых считываний в контроле и колонизированных корневых библиотек P. indica , и 13736 уникальных последовательностей показали гомологию с 941 семейством микроРНК, распределенным у 45 видов растений.Прежде всего, существует 46 предполагаемых новых miRNA и 51 соответствующий предшественник.

Орхидеи – древний вид, появившийся вскоре после массового исчезновения. Они стали самым разнообразным семейством растений в мире [70]. На сегодняшний день проведено лишь несколько исследований miRNA в орхидеях. Они продемонстрировали, что только очень небольшое количество miRNA сохраняется между видами. Большинство известных miRNA являются специфичными для семейства или вида miRNA, которые происходят из событий обратной дупликации или накопления мутаций в инвертированных повторах.Дифференциальная экспрессия miRNAs может иметь важное значение для физиологической функции и вносить вклад в эволюцию видов [71], [72]. К настоящему времени исследования миРНК проведены на тропической орхидее Phalaenopsis [73]. По сравнению с Oncidium , наиболее распространенные верхние 20 miРНК, консервативные в корнях, такие как mir528, mir156, mir166, mir167, mir168, mir159, mir529 и mir894, также были обнаружены в Phalaenopsis . Oncidium -специфические miРНК – это mir397, mir408, mir2916, mir2950, ​​mir5077 и mir5059, а -специфичные miRNA для Phalaenopsis – это mir169, mir172, mir396, mir1318 и mir2911.Кроме того, мы также обнаружили значительное количество новых членов консервативных семейств miRNA и новых miRNA. Известно, что вариация складчатости предшественников miRNA, эффективности процессинга и размера miRNA может влиять на тип созревания miRNA. Молодые miRNAs часто экспрессируются на очень низких уровнях и в ограниченных пространственных / временных паттернах, а некоторые из недавно идентифицированных miRNAs не имеют очевидной функции [72]. Большинство вновь идентифицированных miRNA в этом исследовании имели низкое количество прочтений и были трудно обнаружены с помощью qPCR.Дальнейшие исследования необходимы для выяснения их функции в Oncidium .

Роль миРНК и их мишеней в регулировании уровней фитогормонов и развития корней во время симбиоза

МикроРНК, участвующие в передаче сигналов ауксина, были легко обнаружены в нашем эксперименте, включая miR160, mir164, mir167, mir393, miR394 и mir5293. Кроме mir390, другая родственная ауксину miRNA связана с Arabidopsis TAS 3 РНК и, по прогнозам, нацелена на мРНК, кодирующую LRR-киназу, которая отвечает за регуляцию роста боковых корней [74].Эта миРНК обычна у однодольных растений [75]. Фитогормоны играют ключевую роль в росте и развитии растений, а также необходимы для устойчивости к абиотическим и биотическим стрессам [11], [12], [76], [77]. Ранее было обнаружено, что гены метаболизма фитогормонов, включая ауксин, гиббереллин (GA) и абсцизовую кислоту (ABA), активируются после колонизации корнями ячменя P. indica [11], и ауксин считался ключевым фитогормоном в корнях ячменя. стимуляция роста растений, вызванная P.индика [14], [64]. В наших экспериментах гены, связанные с ауксином, такие как TIR1 , ARF и CUC , которые регулируются mir393, mir160 и mir164, были активированы или подавлены во время различных фаз симбиоза, и предполагаемый GA ген пути, MYB, , регулируемый mir159, подавлялся во время симбиоза. Ауксин и GA, вероятно, действуют как супрессор SA или энхансер JA в симбиотических процессах [11], [78] – [80]. Взятые вместе, высокий уровень экспрессии этой группы miRNAs, вероятно, может уравновешивать рост и защиту во время симбиоза.

Другая группа miRNA, включая mir156, mir166 и mir169, которые нацелены на мРНК для генов факторов транскрипции SPL , PHV / PHB и NTF , также были обнаружены в большом количестве в нашем эксперименте (Таблица S5). Также высоко экспрессируются mir162 и mir168. Они функционируют как регуляторы обратной связи для miRNAs и катализируют мРНК AGO1 и DCL (Table S5). AGO1 и фактор транскрипции PHV / B могут совместно контролировать развитие апикальной меристемы побега (SAM) и апикальной меристемы корня (RAM) [81].Растения, которые не могут экспрессировать эти miRNA-мишени, имеют повреждения в развитии корней [66], [81] – [87]. Более того, эти miRNAs также накапливались в клубеньках Medicago truncatula после колонизации эндофитными грибами [48], [49]. Похоже, что растения перепрограммируют развитие SAM и RAM в симбиотическом взаимодействии с микробами, регулируя экспрессию этих miRNA в критических пространственных и временных паттернах [48].

MiRNA, такие как mir397 или mir408, могут быть необходимы для Oncidium для повышения антиоксидантной способности и устойчивости к стрессу, опосредуя распределение меди и играя роль в метаболизме клеточной стенки во время процессов роста и развития, запускаемых P.Индика .

Выводы

Мы сообщаем о профилировании миРНК орхидеи Oncidium после колонизации P. indica . MiRNA и их гены-мишени показывают, что физиологический метаболизм Oncidium перепрограммируется в ответ на симбиотическое взаимодействие. Гены, участвующие в передаче сигналов фитогормонов, метаболизма клеточной стенки и регуляторных факторов транскрипции, являются основными мишенями для микроРНК, индуцированных P. indica в корнях Oncidium .Следовательно, мы предполагаем, что P. indica изменяет паттерн miRNA, чтобы создать сложную сеть для стимулирования роста, перепрограммирования развития и повышения устойчивости в корнях Oncidium . Было обнаружено несколько новых уникальных miRNA, функция которых еще не была идентифицирована. Дальнейшие исследования молекулярного механизма miRNAs в симбиотических взаимодействиях имеют огромное значение.

Материалы и методы

Растительные материалы

Проростки из колбы Oncidium GR культивировали на среде 1/2 Murashige-Skoog (MS) и инкубировали с 16-часовым фотопериодом (100 мкмоль м -2 с -1 ) при 25 ° C.Отбирали проростки высотой около 3 см и переносили на свежую среду. После 10 дней акклиматизационного культивирования растения инокулировали мицелием P. indica , как описано [52]. Вкратце, один блок агара диаметром 5 мм помещали на проросток на расстоянии 1 см от придаточного корня. Проростки подвергали воздействию либо блока агара, содержащего P. indica (+ P. indica ), либо блока без гриба (контроль; – P. indica ). Через 8 недель совместного культивирования определяли биомассу проростков.Затем их немедленно замораживали в жидком N 2 и хранили при -80 ° C для экстракции РНК и других анализов.

Анатомическое рассечение корневых тканей, колонизированных P. indica

Образцы корней фиксировали в 4% формальдегиде в 20 мМ PBS, pH 7,4, в течение 60 минут при 37 ° C с последующей дегидратацией 5% сахарозой в 20 мМ PBS, pH 7,4 при 4 ° C в течение ночи. Тонкие срезы вырезали свободной рукой и окрашивали хитин-специфическим WGA, конъюгатом Alexa Fluor R 488 (WGA-AF488, Invitrogen USA) или Alexa Fluor R , конъюгированным с сукцинилированным конканавалином A (ConA-AF633, Invitrogen USA), согласно протоколу производителя.Срезы фотографировали на Olympus IX17, WGA-AF488 возбуждали при 488 нм и детектировали при 505–540 нм, ConA-AF633 возбуждали при 546 и детектировали при 600–660 нм.

Конструирование и секвенирование библиотеки малых РНК

Суммарная РНК была выделена из контрольных корней и корней, колонизированных P. indica , с использованием метода сосны. Число целостности РНК (RIN) проверяли на Agilent 2100; когда RIN был> 8,0, образцы отправляли в BGI (Shengzheng China) для секвенирования малой РНК Solexa .Вкратце: маломолекулярные РНК были разделены с помощью 15% (мас. / Об.) PAGE (18–30 нуклеотидов), затем очищенные малые РНК были лигированы с парой адаптеров Solexa на 5′- и 3′-концах, обратная транскрипция в кДНК с использованием праймера RT и, наконец, амплификация с помощью ПЦР и секвенирование. Результаты были депонированы в архиве чтения последовательностей (SRA) на веб-сайте NCBI. Регистрационный номер SRP031471.

Идентификация консервативных и новых miRNA

После удаления адаптерных последовательностей, меток низкого качества и загрязненных последовательностей, рРНК, тРНК, мяРНК и т. Д.были идентифицированы путем сопоставления с базами данных Rfam 10.1 и Genbank. Консервативные miRNA были идентифицированы путем поиска известных растительных miRNA в miRBase 19.0 (http://www.mirbase.org). Новые miRNA были предсказаны Mireap (http://sourceforge.net/projects/mireap/). Вторичная структура всех кандидатов-предшественников была отображена в RNAstructure Web (http://rna.urmc.rochester.edu/RNAstructureWeb/).

Предсказание и аннотация потенциальных мишеней миРНК

Потенциальные мишени для miRNA были предсказаны с помощью psRNATarget (plantgrn.noble.org/psRNATarget/) путем сопоставления с мРНК из Oncidium , Oryza stativa и A. thaliana (данные были загружены из NBCI GenBank), лучшие результаты были выбраны и аннотированы с помощью Blast 2 GO.

Анализ экспрессии miRNA и их потенциальных мишеней с помощью количественной ПЦР в реальном времени

Для анализа экспрессии miRNA и их потенциальных мишеней образцы РНК были выделены из корней, которые были собраны из 3 независимых реплик проростков, культивированных в тех же условиях, что описаны выше.Маломолекулярные и высокомолекулярные РНК выделяли методами LiCl и изопропанола соответственно [73]. Для количественной ПЦР в реальном времени (qPCR) miRNA кДНК были синтезированы с помощью набора QuantiMir RT (RA420AU-3; SBI). Для анализа были выбраны обильно экспрессированные miRNA (в зависимости от количества считываний) и новые miRNA (рисунок S2). Используя 5.8S рРНК в качестве внутреннего контроля, анализы экспрессии этих микроРНК были выполнены с помощью системы Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System с использованием основного набора SYBR Green PCR (с ROX).Реакцию qPCR проводили в реакционной системе на 30 мкл и программировали следующим образом: 95 ° C в течение 2 минут; 40 циклов 95 ° C 15 с, 65 ° C 15 с, 72 ° C 30 с с последующей программой диссоциации от 60 ° C до 95 ° C. Каждую реакцию повторяли трижды.

Для потенциальной целевой кПЦР кДНК синтезировали с помощью набора Revert Aid First Strand cDNA Synthesis (# k1622; Fermentas). Используя актин в качестве внутреннего контроля, реакцию qPCR проводили в реакционной системе на 20 мкл, и программа qPCR идентична описанной выше, но отжиг проводили при 60 ° C.Информация о праймерах представлена ​​в таблице S1.

Страница не найдена «Какой ортопедический имплант

Очевидные особенности:

Общая форма: любой … бумерангизогнутыйизогнутый, в форме банана плоский конический клин плавно изогнутыйПолусферический прямой прямой конический

Фиксация: любой … ЦементЦементная остеоинтеграция проксимальный HA

Конструкция (цементированная): любой…бесцементная композитная балка, конус скольжения, скользящая фиксация без цемента

Уровень фиксации (без цемента): любой … проксимальный весь стержень

Слот для вставки: любой … нет

Винты: любой … 0 или 5 нет

Номер отверстия: любой … 1245 нет

Средний воротник: любой … нос

Боковой воротник: любой… да

Зоны Груена:

Шея / Z7 Граница: любой …

Z7 Форма: любая … вогнутая вогнутая, манжета, малая вогнутая, прямая

Z7 Контур: любые … мягкие бордюры гладкие

Граница Z7 / Z6: любые … средние вогнутые соединения стержней малые вогнутые

Z6 Форма: любой…медленно вогнутая прямая

Z6 Контур: любой … гладкий

Граница Z6 / Z5: любой … медленный конвективный переход к цилиндрическому дистальному стержню

Z5 Форма: любой … вогнутый прямой

Контур Z5: любой … гладкий

Граница Z5 / Z4: любой …

Форма Z4: любой … криволинейный

Контур Z4: любой…тупой, по сравнению с ABG 2, которая имеет форму пули, пулевидную, остроконечную, гладкую

.

Граница Z4 / Z3: любой …

Z3 Форма: любой … выпуклый прямой

Контур Z3: любой … гладкий

Граница Z3 / Z2: любой …

Z2 Форма: любая … угловая выпуклая прямая

Контур Z2: любой…гладкий

Граница Z2 / Z1: любой … переход от цилиндрической зоны 2 к широкой зоне 1, боковой плавник и дорсальный плавник на спинке крыла и рукава крыла любой …

Z1 Форма: любой … угловой выпуклыйбоковой плавникмалый выпуклыйпрямый прямой

Z1 Контур: любой … гладкий

Z1 / граница плеча: любой … большой боковой плавник острый

Форма плеча: любой…острый уголкруглый уголкруглый угол

Контур плеча: любой … вставной пазвставочный паз гладкий

Краткое руководство по номенклатуре орхидей или «Знай, кто у тебя есть!»

Ухаживать за красивым газоном не должно быть сложно. Это может быть так же просто, как выполнение распорядка, который быстро станет вашей любимой частью дня.

Уход за ним может быть невысоким, но не всегда требуется профессионал, чтобы иметь безупречный газон.Вам не нужно платить целое состояние, чтобы иметь по соседству завистливую лужайку. Позвольте нам сообщить вам конфиденциальную информацию: профессионалы в области газонов не делают с вашим газоном ничего такого, что вы не можете сделать в одиночку. Они точно знают, что использовать на вашем газоне, а также когда и как это используется.

Действительно, помощь таких профессионалов, как Lakeland Lawncare, может быть большой, и вы можете делать у них заметки. Тем не менее, если вы сможете позаботиться о собственном дворе, это будет иметь лечебное действие. Лучшие советы по уходу за газоном по-своему и внесению изменений в уход за газоном – это всего лишь одно чтение.Обратите внимание на следующее.

В некоторых случаях эти вещи не обязательно повреждают ваш газон. Однако они могут украсть питательные вещества и воду, якобы предназначенные для выращивания вашего зеленого и красивого двора.

Удаление сорняков

Сорняки не утихают в садах, и мы ничего не можем с этим поделать. Они борются за питательные вещества и воду с растениями и газонными травами, и они распространяются по саду, делая его менее привлекательным.

Существует три метода удаления сорняков: вы вытаскиваете их вручную, удаляете с помощью мотыги и, в худшем случае, вы используете химический продукт.

Обратите внимание, что лучшее время для удаления сорняков – это влажная и сырая почва, потому что сорняки легче вырывать корнями. Если вы этого не сделаете, вы рискуете оставить корни, потому что они застрянут в грязи.

Удаление штриховки

Солома – это покрытие из органических остатков, состоящих из мертвых листьев, травы и корневых стеблей, которые могут накапливаться между листьями и почвой.

Накопление создает препятствие, препятствуя проникновению жизненно важной влаги и питательных веществ к корням через почву.

Земля будет казаться рыхлой, а из-за отсутствия питательных веществ на траве будут оставаться тусклые, безжизненные пятна, что облегчит их поиск. Однако беспокоиться не о чем. Рыхление, то есть процесс сгребания и удаления мульчи с газона, является наиболее выдающимся методом уничтожения соломы.

Удаление мха

Мхи – это нецветущие растения, которые могут захватить ваш ландшафт и вызвать хаос. Они процветают в регионах с большой влажностью, затенением и плохим покрытием.

Уровень мха будет увеличиваться, если его не укрывать или не лечить, что снижает способность травы расти. Прежде чем удалять мох, необходимо определить причину появления мха и устранить ее. Затем его можно накормить и удовлетворить, а оттуда за ним можно будет наблюдать и лелеять.

Газоны с несоответствующей дренажной системой имеют множество недостатков. Начиная от таких проблем, как замачивание в течение нескольких часов, даже дней, и до степени уничтожения вашей зеленой травы.

При модернизации вашей дренажной системы вы должны убедиться, что она обеспечивает достаточное количество воды и питательных веществ по всему газону, и это позволит избежать таких проблем, как затопление травы.Улучшенная система повреждений должна исправить эти проблемы, а не усугубить их.

Эксперт по дренажной системе оценит вашу собственность (склон, почву и т. Д.) И порекомендует то, что лучше всего подойдет вам. Профессионал также будет знать о любых местных ограничениях относительно того, куда вы можете направить воду. Например, сброс воды в ливневую канализацию во многих местах является незаконным. Кроме того, существуют правила, запрещающие попадание воды на тротуары или дороги, которые могут замерзнуть зимой.

Аэрация необходима для поддержания здоровья газона, поскольку она позволяет воздуху и воде проникать в разросшуюся траву или мульчу дерна.

Этот метод позволяет большему количеству воздуха и воды попадать в корневую систему травы, что важно для травы, чтобы получить питательные вещества, необходимые для роста. Это отличный способ справиться с засухой или заболоченными газонами.

Аэрация достигается путем прокалывания небольших ямок в почве определенного уровня и толщины садовой вилкой или специально разработанными инструментами и машинами.

Основная цель аэрации – уменьшить уплотнение почвы. Слои почвы содержат чрезмерное количество твердых частиц, упакованных в небольшом пространстве, что препятствует нормальному потоку воздуха, воды и питательных веществ.

Много дворовой соломы и тяжелые органические соединения, прячущиеся под поверхностью травы, могут лишать корни этих необходимых питательных веществ.

Покрывая всю площадь большим количеством семян в сочетании с удобрениями, избыточный посев омолаживает старые и изношенные газоны.Этот метод улучшает цвет и снижает вероятность проникновения сорняков и мха при заполнении поврежденных и истонченных участков.

Трава должна быть влажной после посева, чтобы способствовать прорастанию, и следует применять подкормку, чтобы сохранить семена и обеспечить питательными веществами.

Этот метод следует выполнять один раз в год, чтобы газон оставался здоровым.

В большинстве магазинов товаров для садоводства есть различные корма для травы и удобрения. Требуемый тип будет определяться почвой и погодными условиями в вашем районе.В большинстве из них есть инструкции по применению, поэтому лучше их придерживаться.

Как правило, вам следует удобрять газон два раза в год, один раз весной – удобрением для двора, богатым азотом, и снова осенью – кормом, богатым фосфором и калием. Все газоны помимо подкормки требуют полива. Если на лужайку не полить достаточно воды, она станет коричневой и потеряет упругость, из-за чего трава останется плоской, когда на нее наступят.

Держите крыс подальше от вашего сада

Кэролайн Брэгдон | 1 июня 2006 г.

Многие садовники хотя бы раз встречались с крысами; у типичного городского садовника, вероятно, их было много.В Нью-Йорке обитает только один вид крыс – норвежская крыса ( Rattus norvegicus ). Норвежская крыса – грызун-комменсал, что означает, что она живет в тесной связи (буквально «делит стол») с людьми. Городские сады особенно гостеприимны для крыс, потому что они обеспечивают пищу, воду и безопасность.

Крысы будут зарываться в любое доступное земляное пространство в непосредственной близости от еды, но предпочитают свежую плодородную почву для строительства своих гнезд – сад для них является главной недвижимостью.Нора крысы может быть глубиной от одного до шести футов и иметь вход, выход и, возможно, даже отверстие для побега. В типичной норе будет проживать семья из примерно восьми крыс. Подсчитав норы, садоводы могут оценить количество крыс, живущих в их саду.

Подробнее: Устойчивые к оленям растения: кустарники и деревья для садовника, пораженного оленями

Когда дело доходит до борьбы с вредителями, садовники обычно предоставляют их самим себе. Некоторые люди хотят поддерживать среду, свободную от пестицидов; другие отчаянно пытаются взять под контроль плохую ситуацию и пробуют любое средство.Обычно с крысами можно эффективно бороться, не полагаясь на токсичные пестициды. Фактически, хорошая программа по содержанию крыс сосредоточена в первую очередь на профилактике.

Узнайте, что нужно крысам, и избавьтесь от этого

Понимание того, как сделать ваше пространство менее гостеприимным, может помочь вам разработать план борьбы с грызунами. Крысы должны съедать от одной до двух унций пищи в день и иметь ежедневный доступ к воде. Крысы будут есть все, что едят люди, и многие вещи, которые мы бы никогда не съели. Они не вегетарианцы; Как и большинство млекопитающих, крысы (особенно репродуктивные самки) нуждаются в животном белке, жире и углеводах в своем рационе.

Крысы будут есть овощи и фрукты в саду, но если это действительно их единственный источник пищи, они в конечном итоге перейдут на место, которое удовлетворяет их потребности в животных белках и жирах. Компостная куча, состоящая только из садовых отходов, не выдержит колонии крыс. Но если в компостную кучу добавить столовые отходы, включая мясо, зерно, масла или другие жиры, она станет для них очень привлекательной. А тепло, генерируемое разложением отходов, создает гостеприимную среду для крыс в холодную погоду.Зоны компоста необходимо тщательно контролировать и, по возможности, хранить в жестких пластиковых или металлических емкостях с плотно закрывающимися крышками.

Мешки с мусором, размещенные рядом с садом, предлагают целую колонию крыс “шведский стол”. Как и компост, мусор следует хранить только в прочных контейнерах с плотно закрывающимися крышками. Садоводы всегда должны убираться после пикников и убирать пищевые отходы на ночь.

Корм, предназначенный для голубей, кошек, собак, цыплят или кроликов, помещенный в сад или рядом с ним, также может привести к кормлению крыс.Отходы животных, такие как собачьи экскременты, также могут обеспечить питание. Некоторые садовники кормят диких кошек, веря, что они отпугнут крыс. Реальность такова, что большинство кошек быстро поражаются. Здоровая размножающаяся самка крысы может иметь помет до 12 щенков несколько раз в год, в то время как средняя кошка может убивать крысу только раз в пару дней. В местах, где много крыс, лучше не кормить других животных.

Крысы ищут убежища в местах, где они чувствуют себя защищенными от хищников.Густые насаждения, высокие сорняки и груды бревен, камней и других беспорядков обеспечивают крысе безопасное убежище. Особенно привлекательны плющ и кусты у земли и вокруг зданий. У крыс очень плохое зрение, и они используют свои усы (или вибриссы), чтобы ориентироваться в окружающей среде; в результате они предпочитают двигаться по прямым линиям и использовать бордюры, стены и фундаменты для передвижения. Садовники, борющиеся с заражением крысами, могут срезать растительность на расстоянии не менее 18 дюймов от стен зданий, убирать плющ или другие лианы с боков зданий и близлежащих деревьев, а также обрезать задние ветви деревьев, которые касаются или трутся о здания.Без укрытия крысы будут менее уверенно пересекать эти открытые зоны и могут перейти в более безопасные места.

Садовник может определить, куда движутся крысы, посмотрев вдоль прямых линий на наличие жирных следов трения, которые оставляют крысы. Эти потертости или пятна содержат феромоны из кожи и шерсти крысы, которые они используют для общения с другими крысами. Смывание следов трения уксусом или биоразлагаемым мылом может помочь прервать их привычный путь к источникам пищи и дому.Аппаратное полотно (полудюймовая сетка) можно установить вдоль основания стен или заборы, препятствующие роению нор. Ткань должна выходить на глубину от 8 до 12 дюймов под землей. Несмотря на то, что крысы могут зарываться глубже, многие крысы не хотят тратить так много энергии на создание гнезда.

План сокращения крыс

  • Переместите компост в контейнеры, устойчивые к грызунам, с плотно закрывающимися крышками.
  • Храните семена и корм для домашних животных в контейнерах, защищающих от грызунов.
  • Удалите опавшие фрукты или орехи.
  • Ежедневно удаляйте все фекалии (собак, кошек, грызунов, птиц) и / или пищевые отходы.
  • Устраните стоячую воду и улучшите дренаж, чтобы вода не скапливалась и не оседала.
  • Уберите беспорядок в складских навесах и гаражах.
  • Подстригайте траву или сорняки и подстригайте растения вокруг зданий и стен.

Монитор для крыс

Ранняя весна перед посадкой – лучшее время для начала наблюдения за крысами. Садоводы должны тщательно проверять участки сада перед посадкой семян, а также позже, когда овощи и цветы активно растут.Ищите норы, пятна, следы грызения, изношенные дорожки и помет – все это указывает на активное заражение крыс. Проверяйте периметр сада несколько раз в неделю на наличие новых видов активности крыс и примите меры, чтобы остановить их.

Короче, думай как крыса. Где я люблю жить? Что я ем? Какими путями я перемещаюсь между едой и гнездом?

Знайте, когда звонить профессионалам

Если дела пойдут совсем плохо, лучше всего нанять специалиста по борьбе с вредителями. В Нью-Йорке они должны быть сертифицированы Департаментом охраны окружающей среды штата Нью-Йорк (DEC). Защищенные от взлома приманки с зарегистрированными EPA приманками для родентицидов могут быть установлены профессионалом и отслеживаться в течение долгого времени. Их следует проверять и пополнять каждую неделю или месяц в зависимости от серьезности заражения. Обязательно прогуляйтесь по местности со своим специалистом и вместе обсудите план лечения.

Защелкивающиеся ловушки тоже работают очень хорошо, но их необходимо устанавливать в ящиках, чтобы птицы, собаки, кошки и даже дети не могли с ними столкнуться. Их следует проверять ежедневно, опорожнять, а затем сбрасывать.

Ядовитая пыль, которую можно посыпать или вдувать в крысиные норы, является незаконной для садов и никогда не должна использоваться – даже сертифицированным специалистом. Они ядовиты не только для крыс, но также могут быть опасны для других животных и детей при попадании внутрь.

Наконец, помните, что некоторые коммерчески доступные устройства не работают и по сути являются пустой тратой времени и денег. Сюда входят звуковые устройства, которые, как утверждается, отпугивают крыс; нет никаких научных доказательств того, что они действительно работают.Не было доказано, что нафталиновые шарики, перцовые аэрозоли, перечная мята или другие дурно пахнущие химические вещества отпугивают крыс. Волосы кошек, собак, человеческих волос или моча, разбрызганные в саду, также не оказывают никакого воздействия на крыс. Остерегайтесь тех, кто заявляет, что у них есть секретное оружие или химическое вещество, которое избавит от крыс. Здесь ничего нет.

Кэролайн Брэгдон – научный сотрудник Отдела ветеринарии и борьбы с вредителями Департамента здравоохранения Нью-Йорка. Г-жа Брэгдон имеет степень магистра общественного здравоохранения Университета Джона Хопкинса и сертифицирована DEC штата Нью-Йорк в области структурной борьбы и борьбы с грызунами.Она работает координатором по связям с общественностью и образованием в рамках Инициативы по крысам в Бронксе и Манхэттене и управляет информационным порталом Нью-Йорка о крысах по адресу www.nyc.gov/rats.

Ссылка скопирована!

Статьи по теме

Не допускайте попадания комаров и клещей в сад и к себе самому ›
Устойчивые к оленям растения: кустарники и деревья для заразившегося оленями садовода ›

Подлинная Бесплатная доставка наездники Wall Art Mosaic Beautiful Til Mosaics

СПЕЦИАЛЬНОЕ ОБСЛУЖИВАНИЕ КЛИЕНТОВ
★ Мы в Mosaics Lab гордимся нашим преданным обслуживанием клиентов, и наша репутация очень много значит для нас.Вот почему мы сделаем все возможное и будем с вами на каждом этапе пути – от помощи вам в подборе мозаики с нашей стены до обеспечения того, чтобы вы с удовольствием повесили ее на свою. Поэтому обязательно обращайтесь к нам, если у вас есть какие-либо вопросы, запросы или если вы хотите получить консультацию, мы здесь, чтобы помочь, и будем рады услышать от вас.

НЕПРЕВЗОЙДЕННОЕ КАЧЕСТВО
★ Это прекрасное искусство мозаики было создано вручную высококвалифицированными и опытными мастерами, которые научились этому ремеслу у своих отцов и предков.
★ Эта мозаика создана с осторожностью, точностью, творчеством и непревзойденным вниманием к деталям.
★ Мы инвестируем в высококачественную плитку ручной работы, отличное мастерство и отличное обслуживание клиентов, поэтому вы можете быть уверены, что полюбите свою мозаику .
★ Мы используем только высококачественную плитку ручной резки из 100% натурального мрамора и камня.
★ TheMosaics Art прослужит вам всю жизнь, и она на 100% гарантирована, чтобы поднять и полностью преобразить ваше жилое пространство.

ПРЕДЛАГАЕМЫЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ И УСТАНОВКА
★ Эта красивая мозаика в своем роде была вырезана и изготовлена ​​вручную чтобы соответствовать вашему полу, стенам, столешнице, кухне и фартуку ванной комнаты.
★ Эта потрясающая мозаика идеально подходит в качестве фрески для любого офиса, спальни, гостиной, столовой, входа, сада или торгового помещения.
★ Мозаика изготавливается на сетчатой ​​опоре, что упрощает установку. Его можно установить непосредственно на любую поверхность или стену, или его можно наклеить на деревянную опору и повесить как настенное украшение.

ДЕТАЛИ ИСКУССТВА МОЗАИКИ
★ Используемые материалы: Мрамор
★ Количество плиток: 19563
★ Количество в упаковке: 1
★ В комплект входит: мозаика, запасные части плитки, водорастворимый клей, руководство по установке.

★ Мы не можем дождаться, когда вы станете поклонником этого замечательного искусства мозаики. ★

.

Вам может понравится

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.