Как штробить стены под проводку — Инструменты штробления

Прокладка электропроводки проводится как в квартирах в новых домах, так и в рамках перепланировки, капитального ремонта здания, которое находится в эксплуатации. Для этого применяют различные способы и инструменты. Можно штробить стены под проводку перфоратором или дрелью, использовать болгарку или штроборез. Каждый метод имеет свои особенности, которые мы рассмотрим более подробно.

Требования к штробам

Электрическую проводку лучше всего прокладывать в стене, закрывать штукатуркой и чистовой отделкой. Чтобы выполнить такие работы правильно, следует учитывать нормы СНиП и соблюдать требования, которые предъявляются к таким коммуникациям:

• Составлять схему нужно с минимальным количеством поворотов.
• Штробы следует нарезать параллельно основным элементам конструкции – только по горизонтальным и вертикальным линиям. Отклонение допускается, если работы ведутся на мансарде с параллельно наклонными поверхностями.
• Ширина и глубина борозды должна быть не более 25 мм, провода в нее должны укладываться полностью, не создавая выступающих участков. Если для монтажа предполагается использовать трубки, то можно увеличить параметры. Длина штробы не должна превышать 3 метров.
• Обязательно следует соблюдать отступы. Расстояние от плиты перекрытия должно быть на уровне от 15 до 40 см, от углов, оконных и дверных проемов – 10 см, от газовых труб – от 40 до 50 см.
• Не допускается штробление по горизонтальным швам в несущих стенах, запрещается перерезать арматуру.

Инструмент для выполнения работ

Выбор инструмента для нарезания штроб зависит от материала стен. Для бетона используют перфоратор и угловую шлифмашинку. Для кирпича – штроборез.

Молоток и зубило

Если нужно сделать небольшие канавки в оштукатуренной поверхности, можно использовать ручной инструмент. Такой способ является трудоемким, поэтому применяется при незначительном объеме работ. Для бетонных или кирпичных стен он не подходит. Работы выполняются в таком порядке:

• по намеченному краю делается выемка;
• поперек борозды прорезается полоса и молотком пробивается канавка на 10 мм.

Штроба с помощью зубила и молотка получается достаточно грубой.

Перфоратор с насадкой

Для нарезки канавок в бетоне применяют перфоратор со сверлом и насадкой «лопатка». С ее помощью можно удобно выдолбить длинное углубление. На участок наносится разметка, вдоль которой делают отверстия с шагом в 1,5 см и глубиной 2,5 см.

С помощью ударного инструмента можно достаточно быстро и точно подготовить канавку под проводку. Но, ее края при этом получаются не очень ровными. Если нужно сделать углубление под монтаж розетки, разметку делают «штыком», а потом дорабатывают «лопаткой».

Болгарка

Сделать точную нарезку в бетонной поверхности можно с помощью болгарки, оснащенной диском с алмазной крошкой. На первом этапе делают разметку – проводят две линии, расстояние между которыми должно равняться ширине канавки. По линиям производится рез алмазным кругом, материал между ними удаляется перфоратором или ручным инструментом. При таком способе образуется много пыли, для удаления которой следует использовать пылесос.

Штроборез

С помощью профессионального инструмента можно сделать аккуратную и ровную борозду с точным соблюдением нужных параметров. В отличие от болгарки штроборез имеет два круга с абразивным напылением, расстояние между которыми регулируется.

Глубина прохода фиксируется. Также он оснащен специальным приспособлением, которое улавливает пыль и твердые частицы стройматериала. Этот инструмент целесообразно использовать в условиях масштабного строительства, стоимость погонного метра его работы выше по сравнению с другими способами.

Технологии и особенности штробления стен

Несмотря на разные технические характеристики применяемых инструментов, технология штробления практически одинакова во всех случаях. Скорость подготовки борозд зависит от вида стройматериала. Быстрее всего можно нарезать канавки в штукатурке или пористых блоках, более трудоемкой является прокладка штроб в бетоне и кирпиче.

До начала работы составляется план, на котором отмечают маршрут прокладки кабеля, розетки, светильники, выключатели. Такую же схему переносят на стены.

Маршрут, по которому будет прокладываться кабель, а также все точки сверления проверяют на наличие старой электропроводки. При наличии проводов или металлических элементов план корректируют. После этого выполняют основные работы. На первом этапе делают полости под розетки и распределительные коробки, потом их соединяют бороздами.

Штробление стен с применением разного инструмента имеет особенности, которые следует учитывать:

• кирпич и бетонная структура могут содержать полости и небольшие камни, поэтому использовать угловую шлифмашинку следует аккуратно, чтобы не потерять управление;
• при сверлении дрелью используют сверло с самым большим диаметром, для контроля глубины на нем делают отметку изолентой;
• в плите перекрытия, которая является основанием пола, нарезать штробы нельзя, прокладывать коммуникации возможно в бетонной стяжке;
• для монтажа кондиционера нарезают канавки шириной 6 см, глубиной 5 см, в которые можно уложить кабели, трубки с теплоизоляцией и гофрированной трубки для отвода влаги.

выбор инструмента и технологии © Геостарт

Рубрика: Ремонт и инженерка

Заменить электропроводку в частном доме не всегда просто, потому что этот процесс связан с закладкой электрических проводов в штробы. Конечно, если не выбрана наружная проводка. А штробление стен под проводку, а точнее сложность этого процесса, зависит от того, из какого материала дом был возведён. И здесь уточним – стены дома, потому что в плиты перекрытия проводить укладку кабелей запрещено. Итак, разбираемся, как штробить стены под проводку, какие инструменты для этого можно использовать.

Требования к штробам

В первую очередь обозначим, что штробить стены просто так нельзя. Существуют регламентированные нормы, которые сформировали СНиП 3.05.06-85. Что же в этом документе обозначено:

• глубина штробы не должна превышать 2,5 см, ширина 3 см;
• максимальная длина одной штробы от распаечной коробки до розетки или светильника – 3 м;
• штробить стены под проводку можно или по вертикали, или по горизонтали;
• исключение из выше обозначенного пункта могут быть только стены мансарды, потому что они имеют наклонное расположение, но и в этом случае штробы прокладывают параллельно скату крыши;
• отступ по стене от плит перекрытия – 15 см минимум, от оконных и дверных проёмов – 10 см минимум, от газо- или теплотрасс – 40 см;
• минимизация поворотов электрической разводки, идеально – прямолинейная трасса, оптимально – с одним поворотом под прямым углом;
• в углах помещения штробить нельзя, это касается также плит перекрытия и несущих стен.

Перед тем как перейти к процессу штробления стен под электропроводку, рекомендуется на бумагу нанести схему, где отображаются места монтажа светильников, включателей и розеток, а также контуры прокладки проводов.

Чем штробить

Если штробление возложено на плечи профессионалов, то у них один инструмент – штроборез. Относится он к категории электроинструментов, и чем-то напоминает болгарку. Но у него есть серьёзное отличие – это два режущих алмазных диска, которые устанавливаются на вращающийся вал. Расстояние между дисками можно увеличивать или уменьшать до определённых пределов. Это позволяет выставлять ширину будущей штробы.

К тому же штроборез от болгарки отличается и тем, что в его конструкции есть защитный кожух, в котором дополнительно установлен патрубок. Это звено соединения электроинструмента с пылесосом. То есть, когда диски режут твёрдый материал, пыль из-под них вылетает, собирается в кожухе и выводится с помощью пылесоса в пылесборник. Последний – это или мешочек, или контейнер. Поэтому, если ставиться вопрос, как штробить стены под проводку без пыли, то ответить на него можно так, выбирайте штробороез.

Есть ещё один инструмент, на который штроборез похож. Это бороздодел. Так вот у последнего всего один режущий алмазный диск. И этим он сильно похож на болгарку, поэтому особой популярности этот агрегат не получил.

Работать со штроборезом достаточно просто. Главное, что кромки штробы получаются ровными. При этом всегда можно задать точный размер её глубины и ширины. Но при этом надо учитывать и тот факт, что саму канавку этот электроинструмент не делает. Он просто прорезает её границы. Сам же строительный материал стены, который остался между прорезями, придётся удалять или вручную с помощью зубила и молотка, или перфоратором.

Перед началом процесса на стену наносят схему прокладки электрических сетей. Готовят инструмент: устанавливают алмазные диски, выставляют глубину и ширину резки, подключают пылесос.

После чего переходят непосредственно к резке стены. Главная задача производителя работ – вести штроборез точно по нанесённым на стены линиям.

Так как в разговоре была упомянута болгарка, то следующий инструмент раскрытия нашей темы именно она.

Болгарка для формирования штроб

Вообще, необходимо отметить, что болгарка – инструмент универсальный. И для штробления стен её используют часто. Но именно в этом процессе с ней много проблем, три из которых особенные:

• большое количество пыли, вылетающей из-под алмазного диска;
• сложно выдерживать точную глубину реза, потому что приходится все делать на глаз;
• возможность прорезать только одну канавку, то есть для получения штробы придётся проходить по нанесённой линии два раза, формируя ширину.

И даже после такого большого объёма проделанных работ штроба ещё не готова. Здесь, как и в случае со штроборезом, придётся выдалбливать материал между канавками перфоратором.

Конечно, и в этом случае можно бороться с пылью. Но для этого надо будет привлечь к работе ещё одного человека. В его задачи входит держать всасывающий патрубок от пылесоса около места реза диском. И даже в этом случае нельзя будет со стопроцентной уверенностью говорить о том, что это штробление без пыли. Часть её все равно будет вылетать и заполнять собой помещение. Поэтому работник должен надевать респиратор.

Ударная дрель или перфоратор

Идём дальше по теме, чем штробить стены под проводку, и переходим к ещё двум электроинструментам – дрели ударного типа и перфоратору. В принципе, оба инструмента работают одинаково:

• по нанесённой на стене линии через каждые 2-3 см сверлятся отверстия на необходимую глубину;
• затем меняется рабочий орган, то есть бур на лопатку или долото;
• инструмент переключается на режим «без сверления»;
• затем он подносится к стене под углом 45°;
• начинается процесс долбления, то есть формируется канавка путём вычищения остатков материала, из которого стена возведена.

Отметим, что этот способ также можно отнести к категории «скоростных», но вот качество штробы оставляет желать лучшего. По сути, на стене образуется канавка с рваными краями, большими выемками, сколами и трещинами. Правда, это небольшая неприятность, потому что впоследствии после укладки проводов штроба покрывается ремонтным составом: штукатуркой или шпаклёвкой.

Дрель для сверления

Ещё один вариант с применением дрели. То есть, если возникает ситуация, когда профессиональных инструментов нет в наличии, то можно обойтись несложным инструментом, который всегда есть в арсенале хозяина дома. Весь процесс заключается в том, что по нанесённой линии, как и в предыдущем случае, высверливаются отверстия через каждые 1-2 см. Для этого используется победитовое сверло. Но учтите, если стена бетонная, то придётся долго её сверлить, что увеличит в несколько раз время проведения работ.

А дальше используют старые дедовские инструменты: зубило и молоток. Ими просто выбивают строительный материал, оставшийся между отверстиями в стене.

Способ на самом деле примитивный. Но если стоит задача проштробить отрезок стены небольшой длины, то он себя на все сто процентов оправдывает.

Не будем выделять в отдельный раздел способ, где используется зубило и молоток без дополнительных инструментов. Вариант можно обозначить, как трудоёмкий, долгий с низкой скоростью проведения строительной операции. Но и он имеет место быть, если под рукой не оказалось дрели, а длина штробы в пределах пары метров. Правда, бороздка под проводку будет низкого качества, да и о её размерных показателях придётся забыть. Но, как обычно, все исправит ремонтный раствор.

Особенности штробления стен из разных материалов

Итак, разобравшись с вопросами, чем и как проштробить стену под проводку, переходим к разбору материалов стены. Здесь самый простой – штукатурка. Она мягкая, легко поддаётся и резки, и долблению, и сверлению. Так что с ней никаких проблем.

Сложности возникнут, если стена бетонная. Сразу отметим, что зубило и молоток здесь не помогут. То есть и ими можно канавку сделать, но на это уйдёт уйма времени. То же самое можно сказать и об обычной дрели, потому что даже победитовой сверло бетон сверлит долго, и оно быстро прогорает, теряя свои прочностные и режущие характеристики, поэтому приходится часто его окунать в воду, чтобы охладить. А на это уходит время.

Что касается кирпича, то здесь можно обойтись и без штробления, если кирпичная кладка ещё не закрыта штукатуркой. Просто провода укладываются в швы между кирпичами. Во всех остальных случаях можно пользоваться описанными выше инструментами, даже зубилом и молотком.

С бетонными блоками могут возникнуть те же проблемы, что и с бетонной монолитной стеной. А вот с блоками из ячеистого бетона проблем меньше. Материал не обладает повышенной твёрдостью, так что не составит усилий сделать в нем штробу.

Штробление несущих стен

И несколько слов о невозможности штробления несущих стен.

В основном эти ограничения касаются городских квартир. И особенно тех, которые расположены в многоэтажном доме, собранном из железобетонных плит. Все дело в том, что арматура являющаяся каркасом стеновых плит, расположена на глубине 2-2,5 см. то есть любая штроба будет оголять арматурный каркас, снижать толщину стены, увеличивая риски её деформации и обрушения. Чего, понятно, допускать нельзя.

С частными домами все намного проще. Особенно, если они возведены из кирпича, блоков разного типа. Здесь учитывается толщина стены и её несущая способность. К примеру, если стена собрана в полтора кирпича, то делать в ней штробы можно без проблем.

Есть, правда, и другие варианты:

• провести оштукатуривание, а уже в нанесённом слое делать штробы;
• облицевать стены гипсокартоном, фанерой, ДСП или ОСП, а под ними уложить электрические провода;
• провести монтаж проводки в специальные плинтусы, такие сегодня присутствует на рынке стройматериалов.

Коротко о главном

Штробить стены – это не самый простой процесс, как может показаться на первый взгляд. Главное – строго придерживаться норм и правил проведения этой строительной операции. Но что касается способов штробления и применяемых инструментов, то их немало.

автор Плотникова Вероника

Определение и значение стробирования | Мерриам-Вебстер Медикал

gating

: действие, процесс или механизм, с помощью которых контролируется прохождение чего-либо встреча

стробирование

болезнь Гоше

Просмотреть другие записи поблизости

Процитировать эту запись «Ворота».

Merriam-Webster.com Медицинский словарь , Merriam-Webster, https://www.merriam-webster.com/medical/gating. По состоянию на 9 ноября 2022 г.

Копировать цитирование

Еще от Merriam-Webster на

gating

Тезаурус: Все синонимы и антонимы к слову gating

Подпишитесь на крупнейший словарь Америки и получите тысячи дополнительных определений и расширенный поиск без рекламы!

Merriam-Webster без сокращений

желчный

См. Определения и примеры »

Получайте ежедневно по электронной почте Слово дня!

---

Большая британская викторина по словарному запасу

• Названный в честь сэра Роберта Пиля, как называется британская полиция?

• Берти Бобби
• Пилхеды Робби

Проверьте свой визуальный словарный запас, ответив на 10 вопросов!

ПРОЙДИТЕ ТЕСТ

Ежедневное задание для любителей кроссвордов.

ПРОЙДИТЕ ТЕСТ

Слова в игре

• «Дундерхед» и другие «приятные» способы сказать «глупый»

  На примере некоторых очень умных щенков

• 10 слов из географических названий

  Бикини, бурбон и бадминтон заняли первые места

• «Гордость»: слово, которое превратилось из порока в силу

  Вы гордитесь Прайдом?

• Когда впервые были использованы слова?

  Найдите любой год, чтобы узнать

Спросите у редакторов

• Буквально

  Как использовать слово, которое (буквально) приводит некоторых людей в. ..

• «Все интенсивные цели» или «Все намерения и цели»?

  Мы намерены разобраться

• Лэй против лжи

  Редактор Эмили Брюстер разъясняет разницу.

• горячий беспорядок

  «Публика в беспорядке»

Игра слов

• Сложные слова SAT

  20 вопросов, которые помогут вам набрать 1600 баллов

  пройти тест

• Встреться со своими страхами

  Не бойтесь отвечать на эти вопросы о. ..

  Пройдите тест

• Назовите эту вещь

  Проверьте свой визуальный словарный запас, ответив на 10 вопросов…

  Пройдите тест

• Орфографическая викторина

  Сможете ли вы превзойти прошлых победителей национального конкурса Spelli…

  Примите участие в викторине

Стратегии гейтирования для эффективного анализа данных проточной цитометрии

Анализ данных в проточной цитометрии

Гейты, графики и регионы — чтобы помочь проанализировать вашу проточную цитометрию

Скачать в формате PDF

Анализ данных проточной цитометрии построен на принципе гейтирования. Ворота и области помещаются вокруг популяций клеток с общими характеристиками, обычно прямым рассеянием, боковым рассеянием и экспрессией маркеров, для исследования и количественной оценки этих представляющих интерес популяций. Здесь мы покажем, как выглядят результаты обычного графика проточной цитометрии и как за несколько простых шагов можно идентифицировать различные клеточные популяции, окрашенные антителами, конъюгированными с флуорофорами.

Прежде чем приступить к эксперименту с проточной цитометрией, рекомендуется, если это возможно, узнать как можно больше о клетках и включить нужные элементы управления. Это могут быть простые вещи, такие как оценка размера ячеек и вероятность их изменения в ходе эксперимента. Это может быть особенно полезно, если вы выполняете внутриклеточное окрашивание, поскольку процесс фиксации и пермеабилизации может изменить размер и гранулярность клеток, что приведет к изменению профилей прямого и бокового рассеяния. Если ваши клетки имеют известный маркер, может быть полезно включить его в свое окрашивание, так как это поможет идентифицировать интересующие вас клетки. И наоборот, известный негатив также может помочь, позволяя вам установить отрицательные ворота и определить реальную популяцию. Чтобы узнать больше об элементах управления, перейдите на страницу, посвященную элементам управления на странице проточной цитометрии.

Рассеяние вперед и в стороны

Первым шагом в стробировании часто является различение популяций клеток на основе их свойств прямого и бокового рассеяния. Прямое и боковое рассеяние дают оценку размера и зернистости клеток соответственно, хотя это может зависеть от нескольких факторов, таких как образец, длина волны лазера, угол сбора и показатель преломления образца и проточной жидкости. Различение популяций клеток может быть относительно простым для клеточных линий, содержащих только один тип клеток, но может быть более сложным для образцов, содержащих несколько типов клеток. Как видно на графике плотности на рисунке 1а, цельная кровь, лизированная эритроцитами, имеет несколько различных популяций. Красные/желтые/зеленые/синие горячие точки указывают на увеличение числа событий, возникающих в результате дискретных популяций клеток. Светорассеяние гранулоцитов, моноцитов и лимфоцитов позволяет отличить их от клеточного дебриса и мертвых клеток. Лимфоциты обведены кружком на рисунке 1b. Мусор и мертвые клетки часто имеют более низкий уровень прямого рассеяния и находятся в левом нижнем углу графика плотности. Порог прямого рассеяния можно увеличить, чтобы избежать сбора этих событий, или их можно удалить путем стробирования интересующих популяций, показанных красным прямоугольником на рисунке 1c. Этот метод часто используется для удаления мертвых клеток, имеющих повышенную аутофлуоресценцию и неспецифическое связывание антител. Однако использование жизнеспособного красителя является гораздо более эффективным и надежным методом. Узнайте больше о красителях жизнеспособности в проточной цитометрии.

События также могут отображаться в виде точечной диаграммы, где информация о плотности не отображается, или в виде контурной карты, показывающей относительную интенсивность шаблонов рассеяния. Выбор дисплея зависит от предпочтений пользователя.

Рис. 1. Цельная кровь, лизированная эритроцитами. (a) График плотности SSC и FCS. Каждая точка или точка на графике представляет собой отдельную частицу, прошедшую через лазер. (b) Ворота применялись для идентификации конкретной популяции, в данном случае лимфоцитов, или для удаления дебриса (c).

Гистограммы с одним параметром

Как мы уже упоминали, ворота могут быть применены к графикам плотности, чтобы исключить популяции (например, мусор) или положительно выбрать популяции для дальнейшего изучения, как это было сделано на рисунке 1b с воротами лимфоцитов. События или клетки внутри ворот могут быть дополнительно проанализированы на экспрессию маркеров. В этом случае кровь окрашивали на CD3 и данные выражали в виде гистограммы после первоначального отбора лимфоцитов. Как видно, есть два пика, которые можно интерпретировать как положительный и отрицательный набор данных, при этом CD3-положительные Т-клетки составляют около 54% ​​клеток в пределах лимфоцитарных ворот. Чтобы точно идентифицировать положительный набор данных, следует повторить проточную цитометрию в присутствии соответствующих контролей, таких как изотип, FMO и неокрашенные контроли. Это особенно необходимо, если наблюдается один отчетливый пик, однако часто при проточной цитометрии наблюдается несколько пиков из-за смешанных популяций. На рис. 2 показана контрольная гистограмма (в данном случае изотипический контроль) синего цвета, наложенная на окрашенный положительный набор данных красным цветом, что позволяет точно идентифицировать положительные клетки.

Рисунок 2. Гистограммы одного параметра. (a) Клетки внутри ворот лимфоцитов, указанные на рисунке 1(b), представлены на гистограмме для оценки относительной экспрессии маркера, в данном случае CD3 PE-750 (MCA463). (b) Наложение отрицательной популяции на окрашенная популяция позволяет легко идентифицировать положительные клетки.

Используя аналитическое программное обеспечение, можно получить измерения и статистику для многих параметров в дополнение к количеству клеток и проценту клеток в пределах ворот. Сюда могут входить такие измерения, как медиана и средняя интенсивность флуоресценции (MFI), часто используемые при небольшом увеличении или уменьшении флуоресценции.

Двухпараметрические графики плотности

На этих графиках отображаются два параметра измерения, один по оси x и один по оси y, а также события в виде графика плотности (или точечного графика). Параметрами могут быть флуоресценция, FCS или SSC в зависимости от того, что вы хотите показать. На рисунке 3 ниже лимфоциты, определенные методом прямого и бокового рассеяния (а), окрашиваются CD3 и CD19 для идентификации популяций Т- и В-клеток. Затем можно количественно определить относительную долю В- и Т-клеток, поместив ворота вокруг отдельных популяций. В этом случае имеется 7,5% В-клеток и 63% Т-клеток (б). Эти данные также могут быть визуализированы, когда график плотности разделен на четыре квадранта, что позволяет вам определять клетки, одиночные положительные для каждого маркера, а также двойные отрицательные и двойные положительные (c). Когда уровни экспрессии не показывают различные популяции или не являются взаимоисключающими, соответствующие элементы управления помогут вам определить положительные и отрицательные популяции.

Рис. 3. Двухпараметрический (двухцветная флуоресценция) график плотности. Цельную кровь, лизированную эритроцитами, окрашивали CD3 (MCA463A647) и CD19 (MCA1940PE). Лимфоциты определяли по профилю прямого и бокового рассеяния (а), а процентное содержание В- и Т-клеток определяли с использованием различных методов стробирования (б) и (в).

Этот простой принцип гейтирования можно применять снова и снова для дальнейшего определения паттернов экспрессии на конкретных типах клеток. Это особенно полезно, поскольку количество маркеров и флуорофоров в одном эксперименте увеличивается. Пример многоцветного эксперимента, в котором использовалась простая последовательная селекция для идентификации конкретных клеточных популяций, показан ниже на рисунке 4. Вкратце, лимфоциты идентифицировали и селектировали по их прямому и боковому рассеянию. Затем CD3-положительные Т-клетки дополнительно идентифицировали и гейтировали по экспрессии CD4 и CD8. Относительная экспрессия CD28 и CD45RA для идентификации CD45RA ⁺ CD28 ⁺ наивных клеток, CD45RA ^– CD28 ⁺ клеток памяти и CD45RA ⁺ CD28 ^– эффекторных клеток затем определяли как в популяциях CD4, так и в CD8. Этот принцип можно продолжить с дополнительными маркерами, но стоит отметить, что по мере того, как клеточные популяции становятся более определенными, в каждом затворе происходит меньше событий, показывающих важность сбора правильного количества клеток.

Рисунок 4. Последовательный гейтирование для определения конкретных подмножеств T. Цельную кровь, лизированную эритроцитами, окрашивали CD3 (MCA463P750), CD4 (MCA1267PB), CD8 (MCA1226PE), CD28 (MCA709A647) и CD45RA (MCA88F) в присутствии йодида пропидия. Стратегия стробирования показана красными стрелками.

Backgating для подтверждения стратегии гейтинга

Backgating является полезным методом идентификации клеток для подтверждения картины окрашивания или метода стробирования. Он позволяет анализировать клетки, идентифицированные в стробе, на точечных диаграммах с различными параметрами. Это может быть полезно, если вы не уверены в своих воротах, уровнях экспрессии, неспецифическом связывании или наличии мертвых клеток и нуждаетесь в дополнительной информации для идентификации ваших клеток. Это можно увидеть на рисунке 5. Цельная кровь, лизированная эритроцитами (а), была окрашена на CD3 и CD14 (б) и ворота были помещены вокруг 3 популяций А, В и С. Можно предположить, что популяция В представляет собой гранулоциты, но не специфичные был использован маркер, поэтому можно использовать стратегию обратного отсчета на графике прямого и бокового рассеяния (с), чтобы попытаться идентифицировать клетки по их прямому и боковому рассеянию. Профили прямого и бокового рассеивания подтверждают стробирование. Клетки A (моноциты) окрашены в синий цвет, клетки B (гранулоциты) окрашены в красный цвет, а клетки C (лимфоциты) окрашены в зеленый цвет.

Рис. 5. Обратный отсчет для определения субпопуляций лейкоцитов. (a) Цельная кровь, лизированная эритроцитами, окрашивалась CD3 (MCA463A647) и CD14 (MCA1568P750) (b). Клетки в воротах A, B и C были закрыты на FSC против SSC (c) для идентификации конкретных популяций лейкоцитов.

Как мы показали, стробирование не должно быть сложным процессом, и, выполнив всего несколько простых шагов, вы можете быстро приступить к анализу определенных клеточных популяций. По мере увеличения количества красителей и флуорофоров вы сможете идентифицировать более специфические клеточные популяции, но будьте осторожны, выполняя правильный контроль, потому что при увеличении флуоресценции вы увеличиваете фон и неспецифическое связывание, что затрудняет анализ данных. .

На всех графиках, представленных здесь (кроме рисунка 1), сначала были исключены мертвые клетки с использованием красителя жизнеспособности, йодида пропидия и дискриминации дублетов, выполненной путем построения графика FSC-H против FSC-A.